KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI
SENYAWA SAPONIN DARI DAUN BUNI
(Antidesma bunius (L.) Spreng.)
SKRIPSI
OLEH:
HADY WIRAPUTRA
NIM 121501061
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI
SENYAWA SAPONIN DARI DAUN BUNI
(Antidesma bunius (L.) Spreng.)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
HADY WIRAPUTRA
NIM 121501061
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SENYAWA
SAPONIN DARI DAUN BUNI (Antidesma bunius (L.) Spreng.)
OLEH:
HADY WIRAPUTRA
NIM 121501061
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 18 Agustus 2016
Disetujui Oleh,
Dosen Pembimbing I Panitia Penguji,
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt.
NIP 195709091985112001 NIP 195108161980031002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.
Dosen Pembimbing II NIP 195709091985112001
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002 NIP 195406281983031002
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, yang telah memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Karakterisasi Simplisia dan Isolasi Senyawa Saponin dari Daun Buni (Antidesma bunius (L.) Spreng.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, yang telah memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., dan juga dengan Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan, dan bantuan selama masa penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung.
v
Penulis juga ingin mengucapkan rasa terima kasih serta penghargaan yang tulus dan tak terhingga kepada orang tua tercinta Ayahanda Husin, Ibunda Sumarsih dan kepada abang tercinta Hendra, Herman Hadi dan Hendri Hady atas doa dan dukungan baik moril maupun materiil kepada penulis.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat dalam skripsi ini. Untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang farmasi.
Medan, September 2016 Penulis,
Hady Wiraputra
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama : Hady Wiraputra
Nomor Induk Mahasiswa : 121501061
Program Studi : S-1 Farmasi Reguler
Judul Skripsi : Karakterisasi Simplisia dan Isolasi Senyawa Saponin dari Daun Buni (Antidesma bunius (L.) Spreng.)
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di Perguruan Tinggi dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, September 2016 Yang membuat pernyataan,
vii
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SENYAWA SAPONIN DARI DAUN BUNI (Antidesma bunius (L.) Spreng.)
ABSTRAK
Tanaman buni (Antidesma bunius (L.) Spreng.) secara tradisional telah digunakan untuk mengobati hipertensi, takikardia, anemia, sifilis, antikanker, antiradikal, sumber pewarna alami dan antidiabetes. Saponin merupakan senyawa fitokimia yang mempunyai kemampuan membentuk busa dan mengandung aglikon polisiklik yang berikatan dengan satu atau lebih gula. Penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi simplisia dan isolasi senyawa saponin dari daun buni dengan kromatografi lapis tipis preparatif dan isolat dikarakterisasi dengan spektrofotometer ultraviolet dan inframerah.
Simplisia daun buni dilakukan karakterisasi kemudian diekstraksi dengan cara maserasi bertingkat menggunakan pelarut n-heksana dan etanol 80%. Selanjutnya ekstrak etanol dihidrolisis dengan HCl 2N kemudian diekstraksi dengan pelarut kloroform. Isolasi dilakukan terhadap ekstrak kloroform dengan cara kromatografi lapis tipis preparatif menggunakan fase diam silika gel GF254 dan fase gerak yang sesuai. Isolat yang diperoleh diuji kemurnian dengan KLT 2 arah dan dikarakterisasi menggunakan spektrofotometer ultraviolet dan inframerah.
Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 7,32%, kadar sari larut dalam etanol 52,70%, kadar sari larut dalam air 23,25%, kadar abu total 6,86% dan kadar abu tidak larut dalam asam 0,94%. Pemisahan fraksi kloroform dengan KLT menggunakan fase gerak n-heksana-etilasetat perbandingan 5:5 diperoleh 13 noda dan hasil KLT preparatif diperoleh 2 isolat murni yaitu isolat 1 (ungu merah) dengan Rf 0,92 dan isolat 2 (biru) dengan Rf 0,78. Hasil karakterisasi isolat 1 diperoleh panjang gelombang maksimum pada 208 nm dan dijumpai adanya gugus hidroksil, gugus -CH alifatis, ikatan C=C, gugus –CH2,
gugus –CH3, dan gugus C-O. Hasil karakterisasi isolat 2 diperoleh panjang
gelombang maksimum pada 204 nm dan adanya gugus hidroksil, gugus -CH alifatis, gugus –CH2, gugus –CH3, dan gugus C-O.
CHARACTERIZATION SIMPLICIA AND ISOLATION OF SAPONINS FROM BUNI LEAVES (Antidesma bunius (L.) Spreng.)
ABSTRACT
Buni (Antidesma bunius L. Spreng) is traditionally used for hypertension,
tachycardia, anemia, syphilis, anticancer, antiradical, source of natural colorants, and antidiabetes. Saponins are phytochemicals that found mainly in plants, which exhibit foaming characteristics and containing polycyclic aglycone that attached with one or more sugar chains. The aim of this research was to do simplicia characterization of buni leaves (Antidesma bunius (L.) Spreng), and isolation of saponins were done by preparative thin layer chromatography, and characterized with ultraviolet spectrophotometer and infrared spectrophotometer.
Buni leaves simplicia was extracted with maceration using n-hexane and then ethanol 80%. Ethanol extract was hydrolysed using hydrochloric acid 2N and then it was extracted with chloroform. Chloroform extract was isolated by preparative thin layer chromatography using stationary phase silica gel GF254 and the suitable mobile phase. The isolates were tested purity using 2 ways TLC and characterized using spectrophotometer ultraviolet and spectrophotometer infrared.
The result of simplicia characterization exhibited the water content value 7.32%, the ethanol soluble extract value 52.70%, the water soluble extract value 23.25%, the total ash value 9.69%, the insoluble ash in acid value 0.94%. The result of isolation chloroform extract with TLC using mobile phase n-hexane-ethylacetate ratio 5:5 was 13 spots and with preparative thin layer chromatography was 13 isolates and take 2 isolate, the first isolate (purple red) with Rf 0,92 and the second isolate (blue) with Rf 0,78. The first isolate characterization by ultraviolet spectrophotometer exhibited a maximum absorption at wavelength 208 nm, infrared spectrophotometer exhibited the presence -OH, aliphatic -CH bond, double bonds of C=C, -CH2 groups, -CH3 groups, and C-O groups. The second
isolate characterization by ultraviolet spectrophotometer exhibited a maximum absorption at wavelength 204 nm, infrared spectrophotometer exhibited the presence -OH, aliphatic -CH bond, -CH2 groups, -CH3 groups, and C-O groups.
xi
Halaman
3.5.5 Larutan pereaksi Dragendroff ... 21
3.5.6 Larutan pereaksi besi(III)klorida 1% ... 21
3.5.7 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard ... 21
3.5.8 Larutan pereaksi Molisch ... 21
3.8 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 23
Halaman
3.9.3 Penentuan golongan glikosida antrakuinon ... 26
3.9.4 Penentuan golongan saponin ... 27
3.9.5 Penentuan golongan tanin ... 27
3.9.6 Penentuan golongan flavonoida ... 27
3.9.7 Penentuan golongan triterpenoida/steroida ,; ... 27
3.10 Ekstraksi Simplisia ... 28
3.11 Analisis Fraksi Kloroform secara Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ... 29
3.12 Isolasi Senyawa Saponin secara Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ... 29
3.13 Uji Kemurnian Terhadap Isolat ... 30
3.13.1 Uji kromatografi lapis tipis satu arah ... 30
3.13.2 Uji kromatografi lapis tipis dua arah ... 30
3.14 Karakterisasi isolat ... 31
3.14.1 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometer ultraviolet (UV) ... 31
3.14.2 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometer inframerah (IR) ... 31
4.6 Analisis Fraksi Secara Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ... 35
4.7 KLT Preparatif pada Fraksi Kloroform ... 35
4.8 Uji Kemurnian Isolat ... 36
xiii
Halaman 4.9.1 Analisa Isolat 1 dengan Spektrofotometer Ultraviolet
(UV) dan Spektrofotometer Inframerah (IR) ……….. 36
4.9.2 Analisa Isolat 2 dengan Spektrofotometer Ultraviolet (UV) dan Spektrofotometer Inframerah (IR) ……….. 38
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 40
5.1 Kesimpulan ... 40
5.2 Saran ... 40
DAFTAR PUSTAKA ... 41
LAMPIRAN ... 44
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
4.1 Hasil identifikasi isolat 1 dengan spektrofotometer ultraviolet
(UV) ... 36 4.2 Hasil identifikasi isolat 1 dengan spektrofotometer inframerah
(IR) ... 37 4.3 Hasil identifikasi isolat 2 dengan spektrofotometer ultraviolet
(UV) ... 38 4.4 Hasil identifikasi isolat 2 dengan spektrofotometer inframerah
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Surat identifikasi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi-Bogor ... 44 2 Gambar tumbuhan buni ... 45 3 Perhitungan kadar karakterisasi simplisia ... 46 4 Bagan kerja pembuatan fraksi daun buni (Antidesma bunius (L.)
Spreng) ... 49 5 Bagan isolasi senyawa saponin dari fraksi klorofrom daun buni
(Antidesma bunius (L.) Spreng) ... 50 6 Kromatogram hasil KLT ekstrak etanol daun buni dengan fase
gerak n-heksana-etilasetat ... 51 7 Harga Rf hasil KLT pada ekstrak etanol daun buni dengan fase
gerak n-heksana-etilasetat ... 52 8 Kromatogram hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan
fase gerak n-heksana-etilasetat ... 53 9 Harga Rf hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan fase
gerak n-heksana-etilasetat ... 54 10 Kromatogram hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan
fase gerak n-heksana-etilasetat jarak rambat 18 cm ... 55 11 Harga Rf hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan fase
gerak n-heksana-etilasetat jarak rambat 18 cm ... 56 12 Kromatogram hasil KLT ekstrak etanol daun buni dengan fase
gerak toluena-etilasetat ... 57 13 Harga Rf hasil KLT pada ekstrak etanol daun buni dengan fase
gerak toluena-etilasetat ... 58 14 Kromatogram hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan
fase gerak toluena-etilasetat ... 59 15 Harga Rf hasil KLT fraksi kloroform daun buni dengan fase
gerak toluena-etilasetat ... 60 16 Kromatogram hasil KLT preparatif fraksi kloroform daun buni
dengan fase gerak n-heksana-etilasetat ... 61 17 Kromatogram hasil KLT 1 arah isolat 1 dengan fase gerak
xvii
Halaman 18 Kromatogram hasil KLT 2 arah isolat 1 dengan fase gerak
n-heksana-etilasetat dan fase gerak toluena-etilasetat ... 63 19 Kromatogram hasil KLT 1 arah isolat 2 dengan fase gerak
n-heksana-etilasetat ... 64 20 Kromatogram hasil KLT 2 arah isolat 2 dengan fase gerak
