LAPORAN
LAPORAN PRAKTIK
PRAKTIKUM
UM
BIOKIMIA
BIOKIMIA
(Kinetika Reaksi Enzim)
(Kinetika Reaksi Enzim)
DISUSUN OLEH KELOMPOK D1
DISUSUN OLEH KELOMPOK D1
1
10
00
06
60
03
31
10
01
10
05
5
S
Siitti
i A
Am
miin
na
ah
h
1
10
00
06
60
03
31
10
01
10
06
6
IIrrm
ma
a Y
Yu
un
niitta
a A
Arry
ya
an
nii
1
10
00
06
60
03
31
10
01
10
07
7
S
Se
ey
y N
Nu
urru
u
U
U!!a
ah
h
1
10
00
06
60
03
31
10
01
10
0"
"
Ha
H
an
nii#
#a
a H
Hu
um
ma
an
nii$$y
ya
a
1
10
00
06
60
03
31
10
01
10
0%
%
&
&a
arra
a '
'e
erriin
na
a
ASIS&EN KELOMPOK(
ASIS&EN KELOMPOK(
A)i Su*riya)i+ S, -arm,
A)i Su*riya)i+ S, -arm,
LA.O/A
LA.O/A&O/IUM
&O/IUM -
-A/MASI
A/MASI &E/PADU UNI& .
&E/PADU UNI& .
P/O/AM S&UDI
P/O/AM S&UDI -
-A/MASI
A/MASI
-AKUL&AS MIPA
-AKUL&AS MIPA
UNIS.A
UNIS.A
011
011
I. I. TTujuujuanan •• DaDa*a*at t mememamahahami mi *r*rin$in$i* i* 2i2inenetiti2a 2a rerea2a2$i $i eneniim m )a)an n !a!a2t2t4r 4r yayann
mem*enaruhi 24n)i$i 4*timum $uatu enim, mem*enaruhi 24n)i$i 4*timum $uatu enim,
•
II.
II. TTeori Deori Dasarasar
Enim
Enim men2atai$i$ men2atai$i$ ham*ir ham*ir $emua $emua rea2$i8rerea2$i8rea2$i a2$i i44i$ i44i$ *entin, *entin, OehOeh 2a
2arerena na itu itu aai i ahi ahi 22e$ee$ehathatan an *en*enetetahuahuan an menmenenenai ai $i!$i!at8at8$i!$i!at at 2im2imia ia )an)an !u
!unn$i $i eneniim m $a$annat at )i)i*e*erru2u2an an a*a*aaiia a a2a2an an memem*m*ereruunana2a2an n nynya a )a)aaamm *r4$e)ur )ian4$a, .eera*a aan imu
*r4$e)ur )ian4$a, .eera*a aan imu 2e$2e$ehatan teah mem*er4eh man!aatehatan teah mem*er4eh man!aat )ar
)ari i *em*ema2a2aiaaian n anaanai$i$i$ i$ enenim im iniini+ + $e*$e*erterti i *a)*a)a a *en*enya2ya2it it in!in!ar2 ar2 mi4mi42ar2ar)ia)ia++ he
he*a*atitititi$+ $+ 2a2an2n2er er *r*r4$4$tatat+ t+ *e*enynya2a2it it *e*enynyumumaat t hahatiti, , A2A2titi#i#itata$ $ enenim im *a*a)a)a eera*a *enya2it mun2in tini )an *a)a eera*a yan ainnya mun2in eera*a *enya2it mun2in tini )an *a)a eera*a yan ainnya mun2in re
ren)an)ah, h, PrPr4$e4$e$ $ u9i u9i enenim im 9u9ua a menmen9a)9a)i i $em$ema2ia2in n *e*entintin n *a)*a)a a *em*emerieri2$2$aanaan eneti2+ 2arena )a*at )i*a2ai untu2 men)ete2$i *ema:a heter4i4t *enya2it8 eneti2+ 2arena )a*at )i*a2ai untu2 men)ete2$i *ema:a heter4i4t *enya2it8 *enya
*enya2it 2it 22eturueturunan nan $e*e$e*erti rti !eni!eni22et4nuet4nuria, ria, &&eah eah )i2)i2etahuetahui i )ena)enan n 9ea$9ea$ah:aah:a enim 9arinan )i)i$triu$i2an )enan ara yan ter4rani$a$i ai2; $e u2an enim 9arinan )i)i$triu$i2an )enan ara yan ter4rani$a$i ai2; $e u2an han
hanya ya mermerui*ui*a2a2an an <2<2antant4n 4n 4n4naar= r= enenim, im, NaNamun mun ha$ha$i i )ar)ari i rerea2$a2$i i enenimim )aam $atu 24m*4nen 9arinan a2an mem*unyai *enaruh u2u* e$ar *a)a )aam $atu 24m*4nen 9arinan a2an mem*unyai *enaruh u2u* e$ar *a)a *r4$e$ enim ain *a)a 24m*4nen yan ainnya )aam 9arinan ter$eut atau *r4$e$ enim ain *a)a 24m*4nen yan ainnya )aam 9arinan ter$eut atau a
ah2h2an an *a*a)a )a 9a9aririnnan an yayan n aaininnynya a $a$ama ma $e$e2a2aii, , PPeneneetatahuhuan an yayan n eeiihh men)aam menenai )i$triu$i enim )i)aam $e men9a)i $anat *entin una men)aam menenai )i$triu$i enim )i)aam $e men9a)i $anat *entin una *emahaman me2ani$me *enya2it e$erta tera*inya,>
*emahaman me2ani$me *enya2it e$erta tera*inya,>MentgomeryMentgomery,Rex. ,Rex. 19931993?? Enim a)aah i42atai$ yan )i*r4)u2$i 4eh 9arinan hi)u* )an )a*at Enim a)aah i42atai$ yan )i*r4)u2$i 4eh 9arinan hi)u* )an )a*at menin2at2an a9u rea2$i yan mun2in ter9a)i )aam 9arinan, Enim e2er9a menin2at2an a9u rea2$i yan mun2in ter9a)i )aam 9arinan, Enim e2er9a )en
)enan an uruurutan tan yanyan terteratuaturr, , .i.ia a rerea2$a2$i i erer9a9aan an tantan*a *a a)aa)anya nya enenim+ im+ ma2ma2aa rea2$i a2an er9aan amat, Mi$a @O
rea2$i a2an er9aan amat, Mi$a @O erea2$i )enan Herea2$i )enan HO mementu2 a$amO mementu2 a$am
2ar4nat+ $eaian )ari*a)anya *a)a $uatu *H $i44i$ a2an teri4ni$a$i )an 2ar4nat+ $eaian )ari*a)anya *a)a $uatu *H $i44i$ a2an teri4ni$a$i )an mementu2 i4n i2ar4nat, Di$4$ia$i ini tentunya ti)a2
mementu2 i4n i2ar4nat, Di$4$ia$i ini tentunya ti)a2 terantun *a)a 2atai$i$terantun *a)a 2atai$i$ enim+ ta*i meru*a2an $i!at $tru2tur a$am itu
enim+ ta*i meru*a2an $i!at $tru2tur a$am itu $en)iri,$en)iri, H
HOO BB@O@O C CH@OH@O33 C H C HBB B H@O B H@O3388
Penuraian a$am 2ar4nat ta*a meaui 2atai$i$ men9a)i H
Penuraian a$am 2ar4nat ta*a meaui 2atai$i$ men9a)i HO )an @O ti)a2O )an @O ti)a2
ter
ter9a$9a$i i $e$e2e2eti2ti2a, a, 2ar2arena ena a9a9u u rerea2$a2$i i ini ini )a)aam am 22enyenyataataanyanya a $an$anat at amamatat++ 2e$eimanan mun2in ti)a2 a2an tera*ai )aam 1 9am, i2a )iami 4nt4h air 2e$eimanan mun2in ti)a2 a2an tera*ai )aam 1 9am, i2a )iami 4nt4h air 2ar4nat au )i
2ar4nat au )itamah2an enim anhhi)ra$e 2a4nat+ ma2a 2e$eimanan a2antamah2an enim anhhi)ra$e 2a4nat+ ma2a 2e$eimanan a2an tera*ai )aam 1 menit, Se )arah merah )aam tuuh $anat 2aya memau tera*ai )aam 1 menit, Se )arah merah )aam tuuh $anat 2aya memau *eruahan @O
*eruahan @Omen9a)i i2ar4nat meaui entu2 *erantara men9a)i i2ar4nat meaui entu2 *erantara a$am 2ar4natyana$am 2ar4natyan
ter)i$4$ia$i, >
ter)i$4$ia$i, >MentgomeryMentgomery,Rex. ,Rex. 19931993??
Enim a)aah Katai$ .i44i$ yan )a*at menin2at2an a9u rea2$i $am*ai Enim a)aah Katai$ .i44i$ yan )a*at menin2at2an a9u rea2$i $am*ai eih )ari 10
tan*a *eruahan *a)a enim )an *enin2atan a9u rea2$i tan*a *eruahan 2e$eimanan >euiirium? $erta *enurunan eneri a2ti#a$i,
La9u /ea2$i 2imia (
Perubahan konsentrasi per unit waktu
>m4 F1 $F1?
/ea2$i 2ataiti2 enimati$(
turnover per unit waktu+ 2ata >2at+ m4 $F1?,
internati4na unit U >Gm4 turn4#er minF1;
1 U 16,7 n2at?,
Pa)a enim !a2t4r8!a2t4r yan mem*enaruhi 24n)u2$i 4*timum enim iaah *H+ Suhu+ 24n$entra$i $u$trat )an enim+ Inhiit4r+ A2ti#at4r, Penamahan $u$trat )enan 24n$entra$i tini a2an menin2at2an 2er9a enim, Karena enim a2an te*at eri2atan )enan $u$trat+ )an ia $u$trat eih anya2 ma2a ti)a2 9a)i ma$aah 2arena ia ter9a)i tumu2an+ a2an ter9a)i antara $u$trat )an $u$trat $aat :a2tu er$amaan, .ere)a ha )enan *enamahan $u$trat 24n$entra$i 2ei+ ma2a a2an ter9a)i tumu2an antara
$u$trat ama )an )enan yan aru untu2 eri2atan )enan enim, Sehina a2ti#ita$ enim a2an teranu, A2ti#at4r *a)a enim )a*at eru*a 24enim atau 24!a2t4r, K4!a2t4r ini eru*a a2ti#at4r an4rani2 )an 24enim eru*a a2ti#at4r 4rani2, Dia:ah ini tae eera*a 24!at4r Enyme
@4!a2t4r Enim
oenz!me
&hiamine *yr4*h4$*hate Pyru#ate )ehy)r4ena$e -a#in a)enine nue4ti)e M4n4amine 4i)a$e Ni4tinami)e a)enine )inue4ti)e Latate )ehy)r4ena$e Pyri)4a *h4$*hate y4en *h4$*h4rya$e @4enyme A >@4A? Aety @4A ar4ya$e
.i4tin Pyru#ate ar4ya$e
5 8De4ya)en4$y 4aamin Methyma4ny muta$e &etrahy)r4!4ate &hymi)yate $yntha$e
Meta" JnB @ar4ni anhy)ra$e JnB @ar4y*e*ti)a$e MB Eco/' MB He42ina$e NiB Urea$e M4 Nitrate re)uta$e Se utathi4ne *er4i)a$e MnB Su*er4i)e )i$muta$e KB Pr4*i4ny @4A ar4ya$e
III.A"at #an Ba$an III. %. A"at 8 .atan *ena)u2 8 @4r4n 2aa 8 @u#et 8 Kerta$ $arin 8 Pi*et tete$ 8 Pi*et u2ur 1 mL; 5 mL; 10 mL 8 St4*:ath 8 S*e2tr4!4t4metri 44rimetri 8 &aun rea2$i 8 ater ath 35 @
III. &. Ba$an
8 Aua)e$t
8 Larutan &@A 0 8 Larutan 2a$ein
8 Larutan )a*ar *4$!at 0,1 M *H " 8 Larutan NaOH 0,5 N
8 Larutan tri*$in > 10 m )aam 5 mL )a*ar *4$!at 0,1M *H " ? 8 /eaent !4in8 @i4ateu
I'. Prose#ur Kerja
&aun t 0 menit
8 arutan )a*ar *4$!at )an tri*$in )ima$u22an 2e)aam taun rea2$i $erta )itamah2an ma$in8ma$in 3 mL arutan &@A 0 + )ia)u2 *erahan )an )iin2ua$i 30 menit *a)a :ater ath 35 @, Kemu)ian )itamah2an arutan 2a$ein $e$uai tae )an )i)iam2an 0 mL )aam emari e$, Lau )i$entri!ua$i 10 menit )an $arin meaui 2erta$ $arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n,
&aun t 0 menit
8 Diin2ua$i 5 menit *a)a :ater ath 35 @ ma$in8ma$in taun
er*ena)u2 yan eri$i 2a$ein $e$uai tae $ami )ia)u2, Kemu)ian )itamah2an erturut8turut arutan uer *4$!at )an arutan tri*$in, Diin2ua$i2an $eama 0 menit *a)a in2uat4r 35
@ )ihitun $eteah *enamahan tri*$in, Dihenti2an rea2$i )enan *enamahan 3 mL &@A 0 2e)aam ma$in8ma$in taun )an )ia)u2 $anat 2uat, Lau Di)iam2an $eama 0 menit )aam air e$ untu2 menyem*urna2an *enen)a*an, Dan )i$entri!ua$i $eama 10 menit 2emu)ian )i$arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n+ yaitu )iam*ur2an mL &@A8-itrat )enan mL NaOH 0,5 M 2emu)ian )itamah2an 1 mL arutan -4in8 @i4ateu > 1 #4ume reaen )itamah 1 #4ume aua)e$t?, Kemu)ian )iam2an 10 menit )an )iteta*2an $era*annya 650 nm,
'. Data Penamatan
Taun
Per"akuan !an #i"akukan Penama$an Larutan
u*er +os+at, tri-sin, #an TA &/
Diinkuasi #an #ieri Larutan
kasein
0entri+uasi #an #isarin
I Larutan er:arna *utih )an $eteah )itamah
&@A men9a)i *utih enin
Larutan er:arna *utih 2eruh )an ter)a*at
$e)i2it en)a*an )i$e2eiin taun Larutan men9a)i er:arna *utih aa2 enin+ namun $eteah )i$arin men9a)i $anat enin II Larutan er:arna *utih Larutan er:arna *utih Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah &@A men9a)i *utih
enin
2eruh )an ter)a*at $e)i2it en)a*an )i$e2eiin taun er:arna *utih aa2 enin+ namun $eteah )i$arin men9a)i $anat enin III Larutan er:arna *utih
)an $eteah )itamah &@A men9a)i *utih
enin
Larutan er:arna *utih 2eruh )an ter)a*at en)a*an )i$e2eiin
taun teta*i ti)a2 terau anya2 Larutan men9a)i er:arna *utih aa2 enin+ namun $eteah )i$arin men9a)i $anat enin I' Larutan er:arna *utih
)an $eteah )itamah &@A men9a)i *utih
enin
Larutan er:arna *utih 2eruh )an ter)a*at
anya2 en)a*an )i$e2eiin taun Larutan men9a)i er:arna *utih aa2 enin+ namun $eteah )i$arin men9a)i $anat enin ' Larutan er:arna *utih
)an $eteah )itamah &@A men9a)i *utih
enin
Larutan er:arna *utih 2eruh )an ter)a*at en)a*an )i$e2eiin
taun teta*i ti)a2 terau anya2 Larutan men9a)i er:arna *utih aa2 enin+ namun $eteah )i$arin men9a)i $anat enin Tau n
Per"akuan !an #i"akukan NaO1 ,2 M Reaen 3o"in4io5a"teu 6
A7ua#est Penentuan Ni"ai Asoransi menunakan 0-ektro+otom eter I Larutan er:arna *utih enin
Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian ata$ er:arna *utih enin )an )iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
h4m4en )an er:arna 2unin
0+050
er:arna *utih enin
ata$ er:arna *utih enin )an )iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
h4m4en )an er:arna 2unin III Larutan
er:arna *utih enin
Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian ata$ er:arna *utih enin )an )iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
h4m4en )an er:arna 2unin
0+060
I' Larutan er:arna *utih enin
Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian ata$ er:arna *utih enin )an )iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
h4m4en )an er:arna 2unin
0+06%
' Larutan er:arna *utih enin
Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian ata$ er:arna *utih enin )an )iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
h4m4en )an er:arna 2unin
0+060
Seteah )itamah2an &@A 0
Ditamah2an Larutan 2a$ein Seteah )i$entri!ua$i
Ditamah2an /eaen -4in8@i4ateu )an Aua)e$t
'I. Per$itunan
• Perhitunan A$4ran$i
AI At0 F At0
0+071 F 0+050 0+01
AII At0 F At0
0+0"1 F 0+051 0+030
AIII At0 F At0
0+0" F 0+060 0+0
AI' At0 F At0
0+0" F 0+06% 0+13%
t t0 F t0 0 'I ∆ A ∆ t 0,021 20 1+05 Q 1083 mm4menit 'II ∆ A ∆ t 0,03 20 1+5 Q 1083mm4menit 'III ∆ A ∆ t 0,024 20 1+ Q 1083 mm4menit 'I' ∆ A ∆ t 0,139 20 6+%5 Q 1083 mm4menit
•Perhitunan K4n$entra$i Su$trat
SI aliquot V total Q 0,1 7 Q 0+0 0+"57 Q 1083 mm4 SII aliquot V total Q 0,5 7 Q 0+0 1+"6 Q 1083 mm4 SIII aliquot V total Q 1 7 Q 0+0 +"571 Q 1083 mm4 SI' aliquot V total Q 3 7 Q 0+0 "+571 Q 1083 mm4
• &ae Ha$i )an ra2
&ae Mahei$8Menten '(mmo"8menit) 90: (mmo") %,2 ; %4< 0+"57 Q 1083 %,2 ; %4< 1+"6 Q 1083 %,& ; %4< +"571 Q 1083 =,>2 ; %4< "+571 Q 1083 &ae Line:e#er8.ur2
1 V (menit8mmo") 1 [S] (%8mmo") >2&,<?% 3500+1750 ===,===@ 6%%+%"60 ?<<,<<<< 350+0053 %<,??> 116+6671 ra2 Line:ea#er8.ur2 0 500 1000 1500 000 500 3000 3500 000 0 00 00 600 "00 1000 100 !>? 0,15 B 7%,61 /R 0,1 %8(0) %8' y a B + )imana a Km Vmax + 1 Vmax
Pa)a ra2+ )i2etahui y 0+15 B 7%+61 1 Vmax 7%+61 1 Vmax 'ma 1 479,61 'ma +0"5 Q 1083 mm4menit
a Km Vmax 0+15 Km 2,085×10−3 K m 3+07 Q 1083 'II. Pema$asan
Pa)a *ra2ti2um menenai 2ineti2a rea2$i enim ini *ener9aan )iai men9a)i aian :a2tu+ yaitu t0 )an t0, Pere)aanya yaitu tereta2 *a)a *ener9aan t0 *emerian 2a$ein )ia2u2an tera2hir $eteah uer+ tri*$in $erta &@A >tri 2ar4yat ai)?, Pa)a t0 2a$ein )ima$u22an )ia:a aar terihat rea2$i a:a yan ter9a)i *a)a 2a$ein, Ma2a 2a$ein ini a2an a2ti! )ia:a rea2$i $am*ai a2hirnya )ieri2an &@A )ia2hir,
Me2ani$me /ea2$i enimati$ yaitu )enan enim )a*at erea2$i )enan eera*a ara+ me$2i )emi2ian ham*ir $emuanya )enan *enurunan (
Penurunan Eneri A2ti#a$i )enan *ementu2an 24n)i$i yan 442 untu2 $taii$a$i 2ea)aan tran$i$i >tran$iti4n8$tate?, Mi$a( *eruahan $tru2trur $u$trat+ ter9a)i *eruahan 24n!4rma$i m4e2u+ enim men)i$t4r$i men9a)i entu2 entu2 tran$i$i+ $ehina menurani eneri yan )i*eru2an untu2 *enyem*urnaan rea2$i,
Penurunan eneri tran$iti4n8$tate+ ta*i tan*a )i$t4r$i $u$trat+ )enan meruah 24n)i$i )i$triu$i muatan yan era:anan )enan tran$iti4n $tate,
Pementu2an 9aur >meta4i$me? aternati#e, @4nt4h( erea2$i tem*4rer )enan $u$trat mementu2 ES 24m*e2$ interme)iate+ yan ta2 mun2in eran$un tan*a enim,
Penurunan *eruahan entr4*i rea2$i >H?+ )enan meni2at $u$trat 24re2$i 4rienta$i rea2$i,
A2ti#ita$ enim ternyata )i*enaruhi anya2 !a2t4r, -a2t4r8!a2t4r ter$eut menentu2an e!e2ti#ita$ 2er9a $uatu enim, A*aia !a2t4r *en)u2un ter$eut era)a *a)a 24n)i$i yan 4*timum+ ma2a 2er9a enim 9ua a2an ma2$ima, .eera*a !a2t4r yan mem*enaruhi 2er9a enim(
a, Su$trat F Enim mem*unyai $*e$ita$ yan tini, A*aia $u$trat 442 )enan enim ma2a 2iner9a enim 9ua a2an 4*tima,
, *H >2ea$aman? F Enim mem*unyai 2e$u2aan *a)a *H tertentu, A)a enim yan 4*tima 2er9anya *a)a 24n)i$i a$am+ namun a)a 9ua yan 4*tima *a)a 24n)i$i a$a, Namun 2eanya2an enim e2er9a 4*tima *a)a *H netra,
, a2tu F a2tu 24nta2rea2$i antara enim )an $u$trat menentu2an e!e2ti#ita$ 2er9a enim, Sema2in ama :a2tu rea2$i ma2a 2er9a enim 9ua a2an $ema2in 4*timum,
), K4n$entra$i 9umah enim F K4n$entra$i enim eran)in uru$ )enan e!e2ti#ita$ 2er9a enim, Sema2in tini 24n$entra$i ma2a 2er9a enim a2an $ema2in ai2 )an e*at,
e, Suhu F Se*erti 9ua *H, Semua enim mem*unyai 2i$aran $uhu 4*timum untu2 2er9anya,
!, Pr4)u2 A2hir F /ea2$i enimati$ $eau meiat2an ha+ yaitu $u$trat )an *r4)u2 a2hir, Daam eera*a ha *r4)u2 a2hir ternyata )a*at menurun2an *r4)u2ti#ita$ 2er9a enim,
Enim tri*$in memii2i *H 4*timum yan 2ha$+ yaitu *H yan menyea2an a2ti#ita$ ma2$ima, Pemeri atau *enerima *r4t4n yan *entin *a)a $i$i 2ataiti2 enim era)a )aam tin2at i4ni$a$i yan )iinin2an, *H 4*timum enim ti)a2 *eru $ama )enan *H in2unan n4rmanya+ )enan *H
yan mun2in $e)i2it era)a )iata$ atau )ia:ah *H 4*timum, A2ti#ita$ 2ataiti2 enim )i)aam $e mun2in )iatur $eaian 4eh *eruahan *a)a *H me)ium in2unan,
&ae eera*a *H 4*timum *a)a enim > Thenawiaya, Maggy. 19!" ?
Enzim -1 o-timum Pe-sin 1,5 Tri-sin 7,7 Kata"ase 7,6 Arinase %,7 3umarase 7," Rionuk" ease 7,"
Diuna2an arutan )a*ar !4$!at yaitu aar enim tri*$in teta* *a)a 24n)i$i 4*timum yaitu e2er9a $eara ma2$ima untu2 eri2atan )enan $u$trat, Di$ini tri*$in a2an e!e2ti! e2er9a *a)a *H 7,7 8 " $e$uai tem*atnya era)a yaitu )i)aam u$u$, A2ti#ita$ enim 9ua erhuunan )enan 2ea)aan i4ni2 m4e2u terutama *a)a aian *r4teinnya+ 2arena rantai *4i*e*ti)a menan)un 2e4m*4282e4m*42 yan i$a meni4n $am*ai 2e $atu tin2at yan terantun *a)a *H yan a)a, Se*erti hanya yan era2u *a)a *r4tein umumnya, Enim memii2i titi2 i$4ee2tri2 )enan muatan ea$ er$ihnya a)aah n4, *H *a)a titi2 i$4ee2tri2+ $eaian *at42an+ ere)a )enan *H *a)a :a2tu a2ti#ita$ ma2$ima, *H 4*tima yan )i*erihat2an *a)a tia* enim ere)a8e)a, Keanya2an enim men*unyai *H 4*tima antara 8"+ namun *a)a eera*a enim yan e2er9a ai2 *a)a )aerah *H yan $em*it, i2a enim )ieri *a)a *H yan e2$trim ma2a a2an ter)enatura$i, Ke*e2an enim terha)a* *eruahan $uhu meru*a2an $aah $atu $ea mena*a *enaturan *H tuuh )ia2u2an )enan $anat ermat, >Mentgomery,Rex. 1993#
&@A>&ri ar4yat ai)? yan meru*a2an aen yan )a*at mem*re$i*ita$i enim aar )a*at menhenti2an re2a$i enimati2 $ehina enim men9a)i in a2ti# )an enim a2an 2ehianan !un$i 2ataiti2nya, Kemu)ian )iin2ua$i2an *a)a $uhu 350@ $e$uai $uhu tuuh yaitu *r4tein 2a$ein )itemu2an, Lau *a)a
aar *r4$e$ *re$i*ita$i men9a)i anar, Lau )i$entri!ua$i untu2 memi$ah2an $u*ernatan )an *eetnya, tartnya )iami untu2 )i u9i )enan met4)e an$4n,
Daam *ra2ti2um ini+ 2ami mea2u2an 3 maam met4)e+ yaitu met4)e mihaei$8menten+ ine:e#eur ur2 )an an$4n, Ma$in ma$in met4)e mem*unyai *rin$i* yan ere)a, Pa)a *rin$i* *er$amaan mihaei$8menten a)aah )a$ar )ari *er$amaan 2ineti2 enim+ 2arena )ia$um$i2an ti*e rea2$inya irre#er$ie+ ma2a ti)a2 ma$aah 9i2a $atu atau eih *r4)u2 yan ter9a)i , 2emu)ian 2arena rea2$inya terantun :a2tu ma2a i$a )i )i!eren$ia2an *er$amaan ini hanya era2u *a)a rea2$i irre#er$ie $atu $u$trat, Dari *er$amaan mihaei$ menten+ ter)a*at 2eterantunan antara 2ee*atan )enan 24n$entra$i $u$trat yan a2an memuat $uatu 2ur#a hi*er4i2, Per$amaan )enan nama Kineti2a Henri8Mihaei$8Menten 2emu)ian )i2eman2an eih 9auh 4eh , E, .ri$ )an , ., S, Ha)ane, Penurunan *er$amaan 2ineti2a yan )iturun2an mere2a ma$ih )iuna2an $eara meua$ $am*ai $e2aran ,
Saah $atu 24ntriu$i utama Henri8Mihaei$8Menten *a)a 2ineti2a enim a)aah meman)an rea2$i enim $eaai )ua taha*an, Pa)a taha* *ertama+ $utrat teri2at 2e enim $eara re#er$ie+ mementu2 24m*e2$ enim8$u$trat, K4m*e2$ ini 2a)an82a)an )i$eut $eaai 24m*e2$ Mihaei$, Enim 2emu)ian menatai$a$i rea2$i 2imia )an mee*a$2an *r4)u2,
Kur#a 2e9enuhan $uatu rea2$i enim yan menun9u22an rea$i antara 24n$entra$i $u$trat >S? )enan 2ea9uan >v ?, Enim )a*at menatai$a$i rea2$i )enan 2ea9uan mena*ai 9utaan rea2$i *er )eti2, Seaai 4nt4h+ tan*a 2eera)aan enim+ rea2$i yan )i2atai$a$i 4eh enim 4r4ti)ina 5T8!4$!at )e2ar42$ia$e a2an memeru2an :a2tu 7" 9uta tahun untu2 menuah 50 $u$trat men9a)i *r4)u2, Namun+ a*aia enim ter$eut )itamah2an+ *r4$e$ ini hanya memeru2an :a2tu 5 mii)eti2,
La9u rea2$i erantun *a)a 24n)i$i arutan )an 24n$entra$i $u$trat, K4n)i$i824n)i$i yan menyea2an )enatura$i *r4tein $e*erti tem*eratur tini+ 24n$entra$i aram yan tini+ )an niai *H yan terau tini atau terau ren)ah a2an menhian2an a2ti#ita$ enim, Se)an2an *enin2atan 24n$entra$i $u$trat en)erun menin2at2an a2ti#ita$nya, Untu2 menentu2an 2ea9uan ma2$imum $uatu rea2$i enimati2+ 24n$entra$i $u$trat )itin2at2an $am*ai a9u *ementu2an *r4)u2 yan ter*antau men9a)i 24n$tan, Ha ini )itun9u22an 4eh 2ur#a 2e9enuhan )i $am*in, Ke9enuhan ter9a)i 2arena $eirin )enan menin2atnya 24n$entra$i $u$trat+ $ema2in anya2 enim ea$ yan )iuah men9a)i 24m*e2$ $u$trate8enim ES, Pa)a 2ea9uan yan ma2$imum >$ ma?+ $emua ta*a2 a2ti! enim a2an eri2atan )enan $u$trat+ )an 9umah
24m*e2$ ES a)aah $ama )enan 9umah t4ta enim yan a)a, Namun+ $ ma
hanyaah $aah $atu 24n$tanta 2ineti2a enim, umah $u$trat yan )i*eru2an untu2 mena*ai niai 2ea9uan rea2$i tertentu 9uaah *entin,
Ha ini )ie2$*re$i2an 4eh 24n$tanta Mihaei$8Menten >% m?+ yan
meru*a2an 24n$entra$i $u$trat yan )i*eru2an 4eh $uatu enim untu2 mena*ai $etenah 2ea9uan ma2$imumnya, Setia* enim memii2i niai % m yan
ere)a8e)a untu2 $uatu $utrat+ )an ini )a*at menun9u22an $eera*a 2uatnya *eni2atan $u$trat 2e enim, K4n$tanta ainnya yan 9ua eruna a)aah k at+
yan meru*a2an 9umah m4e2u $u$trat yan )a*at )itanani 4eh $atu ta*a2 a2ti! *er )eti2,
&ae menenai eera*a K m )ari enim
Enyme Su$trate %m
@hym4try*$in Aety88try*t4*hanami)e 5000 Ly$4yme Hea8&8aetyu4$amine 6 D8aat4$i)a$e Lat4$e 000
&hre4nine )eamina$e &hre4nine 5000 @ar4ni anhy)ra$e @O "000 Peniiina$e .eny*eniiin 50 Pyru#ate ar4ya$e Pyru#ate 00
H@O3 8 1000 A&P 60
Arinine8t/NA $yntheta$e Arinine 3 t/NA 0, A&P 300
[E] =
[E]
0- [ES]
Substitusi [E] kedalam
persamaan (2), didapat
persamaan sbb:
k
1
[E] [S] – [ES](
k
-1+
k
2) = 0
k
1
[S] ( [E]
0- [ES] ) – [ES](
k
-1+
k
2) = 0
k
1
[S] [E]
0=
k
1[S] [ES] - [ES]
(
k
-1
+
k
2)
Pen'ekatan kinetika en(ym)
*sumsi + ) Hi*4te$a pseu'ostea'ystate. Pementu2an i2atan Enim Su$trat menaami 2e9enuhan > stea'y state? *eruahan ESV men9a)i $anat amat >imit 0? )ian)in a9u *ementu2an PV )an *enurunan SV, Da*at )itui$ )aam *er$amaan eri2ut (
ESV a)aah $ei$ih antara a9u *ementu2an ES )i2urani a9u *enuranan ES
*sumsi ++ ) K4n$entra$i Enym 9umah EV0 ti)a2 eruah !un$i :a2tu >24n$tan?+
ini a)aah 9umah >W EV ? enym ea$ EV )an enym teri2at $u$trat ESV, Ma2a )itui$ $eaai eri2ut
A$um$i 2e9enuhan >$tea)y $tate?
-a$e tran$ien ter9a)i 2eti2a 24n$entra$i ES ti)a2 eruah
'0 a)aah a9u rea2$i ini$ia $aat rea2$i $tart
Dan 'ma a)aah a9u rea2$i
ma2$imum
Suatu ara yan ai2 untu2 mene#aua$i Km )a 'ma a)aah mem*4t )ata 2inati2 $eaai *eran)inan terai2 )ari ' )an 24n$entra$i S, P4t *eran)inan ini )ia9u2an 4eh han$ ine:ea#er )an )ean ur2, Peran)inan terai2 )ari *er$amaan mihaei$8menten )a*at )iami $eaai eri2ut (
1 v= Km Vmax x 1 ⦋ S ⦌+ 1 Vmax
/e$i*42a *4t ini mem*unyai 2euntunan 2arena ti)a2 *eru menu2ur ' *a)a 24n$entra$i $u$trat yan $anat tini >$erin $uit untu2 )i)a*at $eara
e2$*erimenta? 2arena 24n$entra$i $u$trat )a*at )irama2an 2emun2inan nya )ari niai 1XSX 0,
Kemu)ian met4)e an$4n yaitu a)anya *enentuan 24n$entra$i *r4)u2 yan )iha$i2an )ari rea2$i tri*$in82a$ein menuna2an $*e2tr4!4t4meter, met4)e ini ertu9uan $u*aya 9umah $u$trat i$a )i 2etahui yan )i 2atai$i$ 4eh enim, Penamahan NaOH untu2 menetra2an trate &@A yan er$i!at a$am )an )i tamah2an 9ua !4in8i4ateu yan er!un$i memeri2an :arna untu2 *emaaan a$4ran$i *a)a $*e2tr!4t4meter,
K4m*4$i$i -en4 /eaent >-4in @i4ateu?
• Su!at Lithium+ m4n4hi)rat • K4ri)a A@ID
• S4)ium tun$tat )ihi)rat • -4$!4r ai)
• S4)ium m4i)at
• .r4m
• Air
S*e2tr4!4t4meter meru*a2an aat yan )iuna2an untu2 menu2ur a$4ran$i )enan ara mee:at2an ahaya )enan *an9an e4man tertentu *a)a $uatu 49e2 2aa yan )i$eut u#et, Seaian )ari ahaya a2an )i$era* )an $i$anya )ie:at2an, Niai a$4ran$i )ari ahaya yan )ie:at2an a2an $ean)in )enan 24n$entra$i arutan )aam u#et, Daam anai$i$ $*e2t4!4t4meter ter)a*at 3 )aerah *an9an e4man+ yaitu )aerah U' >008 3"0nm?+ )aerah #i$ie >3"08700nm? )an in!rare) 70083000nm?, >2h4*2ar+ 1%%0?
Prin$i* 2er9a $*e2tr4!4t4metri er)a$ar2an hu2um amert eer+ ia ahaya m4n42r4mati2 meaui $uatu me)ia arutan+ ma2a $eaian )i*antu2an )an $eaian )i*anar2an, &ran$mitan$ a)aah *eran)inan inten$ita$ ahaya yan )itran$mi$i2an 2eti2a mee:ati $am*e )enan inten$ita$ ahaya mua8mua $eeum mee:ati $am*e, Pa)a *ra2ti2um ini+ yan )iuna2an a)aah $*e2tr4!4t4meter #i$ie 2arena $umer ahayanya a)aah ahaya tam*a2, Setia* $enya:a *unya $era*an ma2$ima *a)a *an9am e4man tertentu, Pan9an e4man ini )i$eut *an9an e4man ma2$imum, Pa)a *an9an e4man ma2$imum+ huunan a$4ran$i )an 24n$entra$i arutan i$a )i$etara2an, Pan9an e4man yan )iuna2an untu2 menu2ur 9umah *r4)u2 yan )iha$i2an a)aah 650nm yan artinya itu meru*a2an *an9an e4man ma2$imum )ari arutan yan )ii)enti2a$i,
Pa)a ra2 ine:eu#er8ur2 yan )iha$i2an ti)a2 inier atau ti)a2 uru$ 2emun2inan e$ar 2arena anya2 !a2t4r yan ter9a)i, Diantaranya a)anya human err4r+ 2arena )ata era$a )ari 2e4m*42 yan ere)a, Kemu)ian
2arena *era2uan terha)a* enim yan ti)a2 teiti atau ti)a2 ai2, Dan 2emu)ian a)anya 2e$aahan )aam *enunaan $*e2tr4!4t4meter, *era2uan u#et haru$ enar hati8hati 2arena itu tem*at ahaya meinta$ untu2 *enu2uran 24n$entra$i, .ia ter)a*at ari$ tanan *a)a aian u#et+ ma2a a2an mem*enaruhi niai 24n$entra$i,
'III. Kesim-u"an
• Ker9a enim )i*enaruhi 24n$entra$i $u$trat+ *H )an $uhu, • &ri*$in mem*unyai *H 4*timum 7+7 F ",
• Met4)e *ra2ti2um 2ineti2a enim )ia2u2an 3 met4)e+ yaitu met4)e
mihaei$8menten+ ine:eu#er8ur2 )an met4)e an$4n,
• Niai a$4ran$i yan )iha$i2an )ari t0 )an t0 menun9u22an
*enin2atan,
• arna yan )iha$i2an )ari *r4)u2 rea2$i enimati$ tri*$in82a$ein a)aah
:arna 2ehi9auan,
• Pr4)u2 )ari rea2$i enim tri*$in82a$ein mem*unyai *an9an e4man
ma2$imum 650 nm,
• ra2 ine:eu#er8ur2 yan )iha$i2an )ari *ra2ti2um ini ti)a2 inier atau
ti)a2 uru$,
•
Niai 'ma +0"5 Q 1083 mm4menit
• Niai K m 3+07 Q 1083
I. Da+tar Pustaka
• An4nim, -chaums /iokimia. Erana; 9a2arta, Daam
htt*(442$,44e,4,i)442$
i)KNYYSNIZ&$@[)2ineti2aBrea2$iBenim[hi)[$4ure$\na#in2$ \$ )ia2$e$ *a)a De$emer 011,
• M4nt4mery+ re+ )22, 1%%3, /iokimia, a)9ah Ma)a Uni#er$ity Pre$$ (
Y4ya2arta,
• M,.er,eremy+ )22, E8442 .i4hemi$try $ith e)iti4n,
• Siman9uta2+ M,&,006, pengantar kinetik en(imatik. Uni#er$ita$ $umatera
utara )ia2$e$ *a)a htt*(re*4$it4ry,u$u,a,i)it$tream13567"%36051060056,*)!
• &hena:i)9a9a+ Dr,Ir, May, 1%". 0ehninger ) asar'asar bikimia. Erana(
a2arta
• An4nim, Dia2$e$ *a)a htt*(:::,$ri),4m)456"1%La*4ran8