PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA IDENTIFIKASI KARAGENAN DARI TALUS Kappaphycus alvarezii (Doty) DARI DESA KUTUH BANJAR KAJA JATI,

PROVINSI BALI

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkaakultas Farmasi

OLEH:

SUBHAN AHBAR LUBIS NIM 111524112

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

2013

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA IDENTIFIKASI KARAGENAN DARI TALUS Kappaphycus alvarezii (Doty) DARI DESA KUTUH BANJAR KAJA JATI,

PROVINSI BALI

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara OLEH:

SUBHAN AHBAR LUBIS NIM 111524112

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

2013

PENGESAHAN SKRIPSI

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA IDENTIFIKASI KARAGENAN DARI TALUS Kappaphycus alvarezii (Doty) DARI DESA KUTUH BANJAR KAJA JATI,

PROVINSI BALI

OLEH:

SUBHAN AHBAR LUBIS NIM 111524112

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Pada Tanggal : Oktober 2013 Pembimbing I,

Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.

NIP 195107231982032001 Pembimbing II,

Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.

NIP 195008221974121002

Panitia Penguji,

Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.

NIP 195709091985112001

Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.

NIP 195107231982032001

Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.

NIP 195109081985031002

Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.

NIP 195112231980032002

Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Dekan,

Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.

NIP 195311281983031002

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat, kasih dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul ”Karakterisasi Simplisia dan Isolasi serta Identifikasi Karagenan dari Talus Kappaphycus alvarezii (Doty) dari Desa Kutuh Banjar Kaja Jati, Provinsi Bali.”Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tulus dan ikhlaskepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan.Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.,selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Bapak Drs.

Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen pengujiyang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan dan Dra. Fat Aminah, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan kepada penulis.Ibu kepala Laboratorium Farmakognosi dan Bapak kepala Laboratorium Penelitian yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama penulis melakukan penelitian.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Ayahanda Drs. H. Syaiful Amri, Lubis, M.Sc., Apt., dan Ibunda Dra. Hj. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., tercinta, yang tiada hentinya berkorban dengan tulus ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga kepada Mertuaku Bapak Agustiyono, Ibu Ariastuti Harianti, Abangku Sukroni Aulia Lubis, S.T., dan adikkuSaputra Ananda Lubis, S.K.M., yang selalu setia memberi doa, dorongan dan semangat.Kepada rekan-rekan farmasi ekstensi stambuk 2011.

Senior dan junior mahasiswa/i Fakultas Farmasi, para asisten laboratorium serta teman-teman yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah memberi bantuan, dukungan, dan motivasi selama penulis melakukan penelitian.

Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna.

Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Harapan saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan kefarmasian.

Medan, Oktober 2013 Penulis

Subhan Ahbar Lubis NIM 111524112

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA IDENTIFIKASI KARAGENAN DARI TALUS Kappaphycus alvarezii (Doty) DARI DESA

KUTUH BANJAR KAJA JATI, PROVINSI BALI ABSTRAK

Hasil rumput laut menjadi komoditas ekspor bernilai ekonomi tinggi adalah karagenan yang digunakan dalam industri pangan, nonpangan (kertas, cat, tekstil, fotografi, pasta dan pengalengan ikan), farmasi dan kosmetik.

Penghasil karagenan antara lainKappaphycus alvarezii (Doty) yang banyak dibudidayakan pada lokasi perairan Desa Kutuh Banjar Kaja Jati, Provinsi Bali.

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia talus Kappaphycus alvarezii (Doty); rendemen karagenan dengan variasi perlakuan suhu dan waktu ekstraksi, serta karakteristik karagenan yang diperoleh memenuhi persyaratan USP XXXTahun 2007.

Metode yang digunakan untuk isolasi karagenan dilakukan dengan empat tahap yaitu tahap praekstraksi (perendaman dan pemutihan), tahap ekstraksi dengan perlakuan lama ekstraksi 30, 60, 120 menit dan temperatur 80^oC, 90^oC, dan 100^oC, tahap pengendapan dengan Isopropil alkohol, tahap pengeringan dan penggilingan. Identifikasi karagenan hasil isolasi meliputi uji viskositas, susut pengeringan, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam, analisis secara spektrofotometri FTIR dan dengan melihat daya kelarutan.

Karakteristik simplisia dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) adalah kadar air 8,64%, kadar sari larut dalam air 22,5%, kadar sari larut dalam etanol 1,10%, kadar abu total 3,20%, dan kadar abu total tidak larut asam 0,13%.Ada pengaruh suhu dan waktu ekstraksi terhadap rendemen karagenan yang diisolasi dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty). Karagenan yang diisolasi dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) telah memenuhi persyaratan USP XXX.Identifikasi karagenan menurut kelarutannya menunjukkan karagenan hasil ekstraksi adalah dalam bentuk kappakaragenan. Hasil spektrum FTIR tersebut menunjukkan bahwa tipe karagenan hasil isolasi adalah kappa karagenan.

Kata kunci: Kappaphycus alvarezii (Doty), karagenan, isolasi, identifikasi, karakterisasi

CHARACTERIZATION OF SIMPLEX AND ISOLATION ALSO IDENTIFICATION OF CARRAGEENANFROM TALUS Kappaphycus alvarezii (DOTY), VILLAGE OF KUTUH BANJAR KAJA

JATI, BALI PROVINCE ABSTRACT

Resultsseaweedintohigh valueexportcommoditiesiscarrageenanused in thefood industry, non-food(paper, paint, textile, photography, pastaand fish), pharmaceuticalsandcosmetics. Producingcarrageenan, among others Kappaphycusalvarezii(Doty), grown onwater locationsKutuhBanjarKajavillageJati, BaliProvince. The purposeof this

studywas to determinethe characteristics simplextalusofKappaphycusalvarezii(Doty);

yieldcarrageenantreatmentwithvariationsin temperature andextractiontime, as well as thecharacteristics ofcarrageenanobtainedmeetsthe requirements ofUSPXXXof 2007.

The method usedfor the isolation ofcarrageenandonewithfourphases:pre- extraction (soaking andbleaching), longtreatmentphaseextractionwithextraction of30, 60, 120minandtemperature of80^oC, 90^oC, and100^oC, the depositionphasewithisopropylalcohol, anddryingstagesmilling. Identificationof the isolatedcarrageenanincludeviscosity test, dryingshrinkage, the determinationof totalash content, ash contentdeterminationis not soluble inacid, spectrophotometricanalysisbyFTIRandevalutesolubility.

CharacteristicssimplextalusofKappaphycusalvarezii(Doty) is8.64%

water content, extractcontentof 22.5% solublein water, soluble inethanolextractcontent1.10%, totalash content of3.20%, andtotalash contentnot0.13% acidsoluble. There isthe effect of temperatureandextraction timeon yieldcarrageenanisolated fromtalusKappaphycusalvarezii(Doty).

Carrageenanisolated fromtalusKappaphycusalvarezii(Doty) has met therequirements ofUSPXXX. Identification ofcarrageenanaccording totheir solubilityshowsisextractedin the form ofkappacarrageenan.

TheFTIRspectraresultsshowedthat the type ofcarrageenaniskappacarrageenanisolated.

Keywords: Kappaphycus alvarezii (Doty), carrageenan, isolation, identification, characterization

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... v

ABSTRACK ... vi

DAFTAR ISI ... vii

DAFTAR TABEL ... xii

DAFTAR GAMBAR ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 4

1.3 Hipotesis ... 4

1.4 Tujuan ... 4

1.5 Manfaat ... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6

2.1 Uraian Tanaman ... 6

2.1.1 Habitat dan sebaran rumput laut ... 6

2.1.2 Perkembangbiakan rumput laut ... 6

2.1.3 Sistematika tumbuhan ... 7

2.1.4 Nama daerah ... 8

2.1.5 Morfologi tumbuhan ... 8

Halaman 2.2 Lokasi Budidaya ... 8

2.3 Kandungan kimia ... 11

2.4 Karagenan ... 11

2.4.1 Struktur karagenan ... 12

2.4.2 Sifat-sifat karagenan ... 13

2.4.2.1 Kelarutan ... 13

2.4.2.2 Viskositas ... 15

2.4.2.3 Pembentukan Gelasi ... 16

2.4.3 Kegunaan Karagenan ... 18

2.4.4 Tumbuhan Penghasil Karagenan ... 19

2.5 Ekstraksi ... 20

2.10 Spektrofotometri Inframerah ... 22

2.10.1 Spektrum Inframerah ... 22

2.10.2 Spektroskopi Inframerah Fourier Transform ... 23

BAB III METODE PENELITIAN ... 25

3.1 Alat ... 25

3.2 Bahan ... 26

3.3 Pembuatan LarutanPereaksi ... 26

3.3.1 Larutan natrium hidroksida 0,1 N (b/v) ... 26

3.3.2 Larutan asam klorida 2 N (v/v) ... 26

3.3.3 Larutan hidrogen peroksida 1 % (v/v) ... 26

3.3.4 Larutan kalsium klorida 1% (b/v) ... 26

3.4 Penyiapan Bahan Tumbuhan ... 26

Halaman 3.4.1 Pengumpulanbahan tumbuhan ... 27

3.4.2 Identifikasi tumbuhan ... 27

3.4.3 Pembuatan simplisia rumput laut ... 27

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 27

3.5.1 Pemeriksaan makroskopik simplisia ... 27

3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 28

3.5.3 Penetapan kadarair ... 28

3.5.4 Penetapan kadarsari yang larut dalam air ... 29

3.5.5 Penetapan kadarsari yang larut dalam etanol ... 29

3.5.6 Penetapan kadarabu total ... 30

3.5.7 Penetapan kadarabu yang tidak larut dalam asam .... 30

3.6Isolasi Karagenan ... 30

3.7Pemeriksaan KarakteristikKaragenan ... 32

3.7.1 Penetapan viskositas ... 32

3.7.2 Penetapan susut pengeringan ... 33

3.7.3 Penetapan kadarabu total ... 33

37.4 Penetapan kadarabu yang tidak larut dalam asam .... 34

3.8 Penetapan karakteristik karagenan dengan Spektrofotometri FTIR ... 34

3.9 Identifikasi Jenis Karagenan Hasil Isolasi ... 34

BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN ... 35

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 35

4.2 Hasil Karakterisisasi Simplisia ... 36

Halaman 4.3 Hasil Isolasi Karagenan ... 37

4.4 Hasil Penetapan Karakteristik Karagenan secara Spektrofotometri FTIR ... 40

4.5 Hasil Identifikasi Jenis Karagenan ... 41

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

LAMPIRAN ... 46

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2 Daya kelarutan karaginan pada berbagai media pelarut ... 14 3 Identifikasi karagenan menurut kelarutannya ... 35 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia talus Kappaphycus

alvarezii(Doty) ... 36 4.2 Hasil perhitungan rendemen karagenan hasil isolasi dari talus

Kappaphycus alvarezii(Doty) ... 38 4.3 Hasil pemeriksaan karakteristik karagenan hasil isolasi dari

talus Kappaphycus alvarezii (Doty) (USP XXX, 2007) ... 39 4.4 Hasil karakteristik karagenan secara Spektrofotometri FTIR ... 40

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Kappa karagenan ... 12

2.2 Iota karagenan ... 13

2.3 Lambda karagenan ... 13

2.4 Mekanisme pembentukan gel karaginan ... 16

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil identifikasi tumbuhan ... 47

2 Gambar simplisiatalus Kappaphycus alvarezii (Doty) ... 48

3 Gambar serbuk simplisia talus Kappaphycus alvarezii (Doty) ... 49

4 Gambar mikroskopik serbuk talus Kappaphycus alvarezii (Doty) 10 x 40 ... 50

5 Perhitungan parameter mutu simplisia ... 51

6 Perhitungan identifikasi karagenan ... 56

7 Spektrum karagenan dengan Spektrofotometer FTIR ... 61

8 Hasil pemeriksaan mutu karagenan hasil isolasi ... 62

9 Gambar karagenan hasil isolasi ... 64

10 Gambar alat yang digunakan ... 65

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar belakang

Indonesia adalah negara kepulauan dengan kawasan pesisir dan lautan yang memiliki berbagai sumber daya hayati sangat besar dan beragam, salah satunya adalah rumput laut. Menurut Istini (1985) dan Anggraini (2004), rumput laut merupakan salah satu sumber devisa negara, sumber pendapatan masyarakat pesisir, dan merupakan komoditi yang potensial dalam meningkatkan pertumbuhan ekonomi karena dapat dipanen dalam 45 hari masa tanam (quick yielding). Rumput laut dapat diolah menjadi bahan makanan, minuman dan obat-obatan. Menurut Dahuri (2000), beberapa hasil olahan rumput laut seperti agar-agar, alginat dan karagenan merupakan senyawa yang cukup penting dalam industri. Di antara ketiga produk rumput laut tersebut, karagenan merupakan komoditi ekspor yang palingmenguntungkan.Besarnya keuntungan yang dapat diperoleh dan potensi alam yang mendukung dalam budidaya rumput laut penghasil karagenan membuat Indonesia menjadi negara terbesar kedua penghasil karagenan, setelah Philipina (Faridah, 2001).

Karagenan merupakan senyawa yang termasuk kelompok polisakarida galaktosa hasil ekstraksi dari rumput laut. Sebagian besar karagenan mengandung natrium, magnesium, dan kalsium yang dapat terikat pada gugus ester sulfat dari galaktosa dan polimer 3,6-anhydro-galaktosa (Anonim¹, 2010)

Karagenan dihasilkan oleh rumput laut merah (Rhodophyceae).Salah satu jenis Rhodophyceae penghasil karagenanyang telah berhasil dibudidayakan di Indonesia adalah Eucheuma sp. yaitu Eucheuma cottonii(Doty)menghasilkan jenis karagenan kappa.Eucheuma spinosum adalah spesies utama untuk menghasilkan jenis karagenan iota. Karagenan lamda diproduksi dari spesies Gigartina dan Chondrus crispus (Aslan, 1998; Abbott dan Norris, 1985; Van de Velde,etal., 2002).

Menurut Doty (1985), Euchema cottonii(Weber-van Bosse) berubah nama menjadi Kappaphycus alvarezii karena karagenan yang dihasilkan termasuk fraksi kappa-karagenan, maka jenis ini secara taksonomi disebut Kappaphycus alvarezii (Doty). Nama dagang ‘cottonii’ umumnya lebih dikenal dan biasa dipakai dalam dunia perdagangan nasional maupun internasional.

Karagenan digunakan untuk industri makanan yang berfungsi sebagai pensuspensi, penstabil, pembentuk gel, pengental, dan bodying agent. Beberapa produk makanan yang menggunakan karagenan adalah jeli, saus, sirup, dodol, nugget, dan produk susu.Karagenan digunakan juga dalam industri nonpangan yaitu industri kertas, cat, tekstil, fotografi, pasta dan pengalengan ikan(Anggadiredja, dkk.,2008). Pada industri farmasi karagenan digunakan sebagai pengemulsi, larutan granulasi dan pengikat.Pada industri kosmetikkaragenan digunakan sebagai stabiliser, suspensi dan pelarut.Produk kosmetik yang sering menggunakan karagenan adalah salep, kream, losion, pasta gigi, tonic rambut, stabilizer sabun, minyak pelindung sinar matahari, dan lain-lain.(Anonim², 2011).

Rendemen karagenan menurut Basmal, et al.,(2009) dalam penelitian pengolahan Semi Refined Carrageenan (SRC)lebih banyak dipengaruhi oleh perlakuan suhu dan waktu ekstraksi.Karagenan dapat terlepas dari dinding sel dan larut jika kontak dengan panas. Rumajar,dkk., (1997), mengemukakan bahwa degradasi panas yang terjadi akibat waktu ekstraksi yang terlalu lama menyebabkan perubahan atau putusnya susunan rantai molekul. Besarnya suhu pada saat ekstraksi juga perlu diperhatikan. Suhu ekstraksi menurut Rasyid (2003) adalah 85-95^oC, Setyowati (2000), pada suhu 90^oC, Aslan (1998) pada suhu 90-95^oC dan Mukti (1987), pada suhu optimum 90-95^oC.

Penelitian mengenai potensi karagenan yang diisolasi dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) dari beberapa daerah pesisir di Indonesia telah banyak dilakukan. Munthe (2012), menyebutkan bahwa isolasi karagenan dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) dari kelompok pembudidaya rumput laut Beringin-Berjaya, Dusun III, Desa Kuala Tanjung, Kecamatan Sei Suka, Kabupaten Batubara, Provinsi Sumatera Utara menghasilkan rendemen karagenan 37,58%. Namun demikian penelitian mengenai karakterisasi simplisia dan isolasi karagenan dari Kappaphycus alvarezii (Doty) yang berasal dari desa Kutuh Banjar Kaja Jati, Provinsi Bali belum ditemukan.

Berdasarkan uraian di atas dan mengingat potensi Kappaphycus alvarezii (Doty) sebagai penghasil karagenan dari perairan Indonesia, makaperlu dilakukan penelitian karakterisasi simplisia dan isolasi karagenan dari Kappaphycus alvarezii (Doty) yang berasaldari tempat tersebut.

1.2 Perumusan masalah

Perumusan masalah pada penelitian ini adalah:

a. Bagaimanakahkarakteristiksimplisia dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty)yang berasal daridesa Kutuh Banjar Kaja Jati, Provinsi Bali?

b. Apakah ada pengaruh variasi suhu dan waktu rendemen karagenanyang diisolasidari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) dengan?

c. Apakahkaragenan yang diisolasidari talus Kappaphycus alvarezii (Doty)memenuhi persyaratan United States Pharmauceuticals XXX?

1.3 Hipotesis

Hipotesis pada penelitian ini adalah:

a. Karakteristik simplisia dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty)yang berasal daridesa Kutuh Banjar Kaja Jati,Provinsi Bali dapat dilakukan.

b. Perlakuan suhu dan waktu berpengaruh terhadap rendemen karagenan yang diisolasi dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty).

c. Karagenan yang diisolasidari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) memenuhi persyaratan yang terdapat dalam United States Pharmauceuticals XXX.

1.4 Tujuan

Tujuan pada penelitian ini adalah:

a. Untukmengetahui karakteristik simplisiadari talus Kappaphycus alvarezii (Doty)yang berasal daridesa Kutuh Banjar Kaja JatiProvinsi Bali.

b. Untuk mengetahui rendemen karagenan yang diisolasidari talus Kappaphycus alvarezii (Doty)denganvariasi suhu dan waktu.

c. Untuk mengetahui karagenan yang diisolasi dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) memenuhi persyaratan United States Pharmauceuticals XXX.

1.5 Manfaat

Manfaat pada penelitian ini adalah:

Sebagai informasi tentang karakteristik simplisia dan karagenan hasil isolasidari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) sehingga dapat dikembangkan dan dimanfaatkan secara optimal untuk berbagai keperluan seperti diformulasi menjadi bahan tambahan obat alami.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tanaman

Rumput laut atau Algae termasuk tumbuhan bertalus karena mempunyai struktur kerangka tubuh (morfologi) yang tidak berdaun, berbatang dan berakar semuanya terdiri dari talus saja (Aslan, 1998).

2.1.1 Habitat dan sebaran rumput laut

Rumput laut umumnya terdapat di daerah tertentu dengan persyaratan khusus, kebanyakan tumbuh di daerah pasang surut (intertidal) atau pada daerah yang selalu terendam air (subtidal) melekat pada substrat didasar perairan yang berupa karang batu mati, karang batu hidup, batu gamping atau cangkang moluska. Umumnya tumbuh dengan baik di daerah pantai terumbu, karena di tempatinilah beberapa persyaratan untuk pertumbuhannya banyak terpenuhi, diantaranya faktor kedalaman perairan, cahaya, substrat dan gerakan air.Habitat khas adalah daerah yang memperoleh aliran air laut yang tetap, lebih menyukai variasi suhu harian yang rendah dan substrat batu karang mati.Rumput laut tumbuh berkelompok dengan jenis rumput laut lainnya (Aslan, 1998).

2.1.2 Perkembangbiakan rumput laut

Perkembangbiakan rumput laut dapat terjadi melalui dua cara, yaitu secara vegetatif dengan talus dan secara generatif dengan talus diploid yang menghasilkan spora. Perbanyakan secara vegetatif dikembangkan dengan cara stek, yaitu potongan talus yang kemudian tumbuh menjadi tanaman baru.

Sementara perbanyakan secara generatif dikembangkan melalui spora baik alamiah maupun melalui budidaya. Pertemuan dua gamet membentuk zygot yang selanjutnya berkembang menjadi sporofit, individu inilah yang mengeluarkan spora dan berkembang melalui pembelahan dalam sporogenesis menjadi gametofit (Anggadiredja, dkk., 2010).

Faktor biologi utama yang menjadi pembatas produktivitas rumput laut yaitu faktor persaingan dan pemangsa dari hewan herbivora.Selain itu dapat pula dihambat oleh faktor morbiditas dan mortalitas rumput laut itu sendiri.Morbiditas dapat disebabkan oleh penyakit akibat dari infeksi mikroorganisme, tekanan lingkungan perairan (fisika dan kimia perairan) yang buruk, serta tumbuhnya tanaman penempel (parasit). Sementara itu mortalitas dapat disebabkan oleh pemangsaan hewan-hewan herbivora (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.1.3 Sistematika tumbuhan

Berdasarkan hasil identifikasi LIPI,taksonomi rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty) diklasifikasikan sebagai berikut:

Filum : Rhodophyta Kelas : Rhodophyceae Bangsa : Gigartinales

Suku : Solieriaceae Marga : Kappaphycus

Jenis : Kappaphycus alvarezii (Doty)

2.1.4 Nama daerah

Nama daerah (dagang) yang lebih dikenal untukKappaphycus alvarezii (Doty) yaitu Eucheuma cottonii dan Eucheuma alvarezii (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.1.5 Morfologi tumbuhan

Ciri-ciri Kappaphycus alvarezii (Doty) yaitu talus silindris, permukaan licin, berwarna cokelat kemerahan.Percabangan talus berujung runcing atau tumpul, ditumbuhi nodulus (tonjolan-tonjolan) dan duri untuk melindungi gametangia. Percabangan bersifat alternates (berseling), tidak teratur serta dapat bersifat dichotomus (percabangan dua-dua) atau trichotomus (sistem percabangan tiga-tiga) (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.2 Lokasi Budidaya

Pemilihan lokasi merupakan langkah pertama yang sangat penting dalam menentukan keberhasilan usaha budidaya rumput laut..Hal ini dikarenakan produksi dan kualitas rumput laut dipengaruhi oleh faktor-faktor ekologi yang meliputi kondisi substrat perairan, kualitas air, iklim, dan geografis dasar perairan.

Persyaratan lokasi yang dapat dijadikan tempat untuk budidaya Kappaphycus alvarezii (Doty) antara lain sebagai berikut:

a. Kondisi dasar perairan

Dasar perairan berupa pasir kasar yang bercampur dengan pecahan karang.Kondisi substrat dasar seperti ini menunjukkan adanya pergerakan air yang baik sehingga cocok untuk budidaya rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty).

b. Tingkat kejernihan air

Keadaan perairan untuk budidaya rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty) sebaiknya relatif jernih dengan tingkat kecerahan tinggi, dan tampakan (jarak pandang kedalaman) dengan alat Sechidisk mencapai 2-5 m. kondisi seperti ini dibutuhkan agar cahaya matahari dapat mencapai tanaman untuk proses fotosintesis.

c. Salinitas

Salinitas (kandungan garam NaCl dalam air) untuk pertumbuhan rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty)yang optimal berkisar 28-33 per mil.Oleh karena itu, lokasi budidaya diusahakan yang jauh dari sumber air tawar seperti dekat muara sungai karena dapat menurunkan salinitas air.

d. Suhu air

Suhu air berperan penting dalam proses fotosintesa, dimana semakin tinggi intensitas matahari dan semakin optimum kondisi temperature, maka akan semakin nyata hasil fotosintesanya. Kecukupan sinar matahari sangat menentukan kecepatan rumput laut untuk memenuhi kebutuhan nutrient seperti karbon (C), nitrogen (N), dan posfor (P) untuk pertumbuhan dan pembelahan selnya. Rumput laut memiliki toleransi terhadap kisaran suhu yang spesifik karena enzim, dan akan tumbuh subur pada daerah daerah yang

sesuai dengan suhu laut yaitu optimal disekitar tanaman yaitu berkisar 26- 30^oC.

e. Pergerakan air (arus dan ombak)

Lokasi untuk budidaya rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty) harus terlindung dari arus (pergerakan air) dan hempasan ombak yang terlalu kuat.

Apabila hal ini terjadi, arus dan ombak akan merusak dan menghanyutkantanaman. Pergerakan air berkisar 0,2-0,4 m/detik. Dengan kondisi seperti ini akan mempermudah penggantian dan penyerapan hara yang diperlukan oleh tanaman, tetapi tidak sampai merusak tanaman.

f. Pencemaran air

Hindari lokasi yang berdekatan dengan sumber pencemaran air, seperti industri dan tempat bersandarnya kapal-kapal.

g. Kedalaman air

Lokasi budidaya dengan kedalaman air pada saat surut terendah minimal 0,40 m sampai kedalaman dimana sinar matahari masih dapat mencapai tanaman dan petani mampu melakukan kegiatan. Metode budidaya yang akan digunakan akan sangat ditentukan oleh kedalaman air di lokasi budidaya.

h. Aman dari predator

Lokasi budidaya bukan merupakan tempat berkumpulnya predator rumput laut, seperti ikan, penyu, bulu babi, dan herbivora lainnya sehingga

kerusakan tanaman dapat ditekan juga dapat menghemat biaya pemeliharaan dan perlindungan terhadap hama tanaman.

i. Bukan merupakan jalur pelayaran

Keamanan dan keberlanjutan budidaya maka lokasi yang dipilih bukan merupakan tempat yang menjadi jalur pelayaran.

Faktor lain yang tidak kalah pentingnya dalam penentuan lokasi yaitu faktor kemudahan dan konflik kepentingan (parawisata, perhubungan, dan taman laut nasional) (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.3 Kandungan kimia

Jenis rumput laut yang termasuk dalam kelas Rhodophyceae (alga merah) mengandung pigmen antara lain klorofil a, klorofil d, α dan β karoten, lutein, zeaxanthin, fikosianin dan fikoeritrin. Fikoeritrin merupakan suatu pigmen dominan yang menyebabkan warna merah pada alga merah (Dawes, 1981).

2.4 Karagenan

Karagenan yaitu suatu senyawa hidrokoloid yang merupakan polisakarida rantai panjang yang diekstraksi dari rumput laut jenis-jenis karaginofit, seperti Eucheuma sp., Chondrus sp., Hypnea sp., dan Gigartina sp.

Polisakarida tersebut disusun dari sejumlah unit galaktosa dengan ikatan α- (1,3)-D-galaktosa dan β-(1,4)-3,6 anhidro-D-galaktosa secara bergantian, baik

mengandung ester sulfat atau tanpa sulfat pada karagenan tersebut (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.4.1 Struktur karagenan

Karagenan merupakan polisakarida linier atau lurus, dan merupakan molekul galaktan dengan unit-unit utamanya adalah galaktosa.Karagenan merupakan molekul besar yang terdiri dari 1000 residu galaktosa. Karagenan dibagi atas tiga kelompok utama yaitu:

a. Kappa karagenan

Kappa karagenan (Gambar 2.1) terdiri dari unit D-galaktosa-4-sulfat dan 3,6- anhidro-D- galaktosa. Karagenan juga sering mengandung D-galaktosa-6 sulfat ester dan 3,6-anhidro-D-galaktosa 2-sulfat ester. Adanya gugusan 6- sulfat dapat menurunkan daya gelasi dari karagenan, tetapi dengan pemberian alkali mampu menyebabkan transeliminasi gugusan 6-sulfat, sehingga menghasilkan bentuk 3,6-anhidro-D-galaktosa. Dengan demikian derajat keseragaman molekul meningkat dan daya gelasinya juga bertambah.

Gambar 2.1.Kappa Karagenan b. Iota karagenan

Iota karagenan (Gambar 2.2) ditandai dengan adanya 4-sulfat ester pada setiap residu D galaktosa dan gugusan 2-sulfat ester pada setiap gugusan 3,6- anhidro-D- galaktosa. Gugusan 2-sulfat ester tidak dapat dihilangkan oleh proses pemberian alkali seperti halnya kappa karagenan.

Gambar 2.2.Iota Karagenan c. Lamda karagenan

Lamda karagenan (Gambar 2.3) berbeda dengan kappa dan iota karagenan, karena memiliki sebuah residu disulphated α-(1,4)-D-galaktosa (Winarno, 1990).

Gambar 2.3.Lamda Karagenan 2.4.2 Sifat-sifat karagenan

Sifat-sifat karagenan meliputi kelarutan, viskositas, dan pembentukan gel.

2.4.2.1 Kelarutan

Kelarutan karagenan dalam air dipengaruhi oleh beberapa faktor diantaranyatipe karagenan, temperatur, pH, kehadiran jenis ion tandingan, dan zat-zat terlarutlainnya. Gugus hidroksil dan sulfat pada karagenan bersifat hidrofilik, sedangkangugus 3,6-anhidro-D-galaktosa lebih hidrofobik.

Lamdakaragenan mudah larutpada semua kondisi karena tanpa unit 3,6-anhidro- D-galaktosa dan mengandunggugus sulfat yang tinggi. Karagenan jenis iota bersifat lebih hidrofilik karenaadanya gugus 2-sulfat dapat menetralkan 3,6- anhidro-D-galaktosa yang kuranghidrofilik. Karagenan jenis kappa kurang hidrofilik karena lebih banyak memilikigugus 3,6-anhidro-D-galaktosa (Towle 1973).

Karakteristik daya larut karagenan juga dipengaruhi oleh bentuk garam darigugus ester sulfatnya.Jenis sodium umumnya lebih mudah larut, sementara jenispotasium lebih sukar larut.Hal ini menyebabkan kappakaragenan dalam bentukgaram potasium lebih sulit larut dalam air dingin dan diperlukan panas untukmengubahnya menjadi larutan, sedangkan dalam bentuk garam sodium lebihmudah larut.Lamdakaragenan larut dalam air dan tidak tergantung jenisgaramnya (cPKelco ApS 2004 diacu dalam Syamsuar 2006).

Suryaningrum (1988) menyatakan bahwa karagenan dapat membentuk gelsecara reversibel artinya dapat membentuk gel pada saat pendinginan dan kembalicair pada saat dipanaskan.Pembentukan gel disebabkan karena terbentuknyastruktur heliks rangkap yang tidak terjadi pada suhu tinggi.Daya kelarutankaragenan pada berbagai media dapat dilihat pada Tabel 2.

Tabel 2 Daya kelarutan karagenan pada berbagai media pelarut.

No Medium Kappa Iota Lamda

1 Air Panas Larut di atas 60^oC Larut di atas 60^oC Larut

2 Air dingin Garam natrium larut, garam K, Ca, tidak larut

Garam Na larut Ca memberi dispersi thixotropic

Larut

3 Susu panas Larut Larut Larut

4 Susu dingin Garam Na, Ca, K tidak larut tetapi akan mengembang

Tidak larut Larut

5 Larutan gula pekat Larut (Dipanaskan) Larut, sukar Larut (Dipanaskan)

Larut (dipanaskan) 6 Larutan garam pekat Tidak larut Larut (dipanaskan) Larut (dipanaskan)

Sumber: Indriani dan Sumarsih,1991 2.4.2.2 Viskositas

Viskositas adalah daya aliran molekul dalam sistem larutan.Viskositas suatu hidrokoloid dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu konsentrasi karagenan, suhu, jenis karagenan, berat molekul, dan adanya molekul-molekul lain (Towle 1973; FAO 1990). Jika konsentrasi karagenan meningkat maka viskositasnya akan meningkat secara logaritmik. Viskositas akan menurun secara progresif dengan adanya peningkatan suhu, pada konsentrasi 1,5%, dan suhu 75^oC nilai viskositas karagenan berkisar antara 5–800 cP (FAO 1990).

Viskositas larutan karagenan terutama disebabkan oleh sifat karagenan sebagai polielektrolit.Gaya tolakan (repulsion) antar muatan-muatan negative sepanjang rantai polimer, yaitu gugus sulfat, mengakibatkan rantai molekul menegang.Karena sifat hidrofiliknya, polimer tersebut dikelilingi oleh molekul- molekul air yang terimobilisasi, sehingga menyebabkan larutan karagenan bersifat kental (Guiseley, et al., 1980).

Moirano (1977), mengemukakan bahwa semakin kecil kandungan sulfat, maka nilai viskositasnya juga semakin kecil, tetapi konsistensi gelnya semakin meningkat. Adanya garam-garam yang terlarut dalam karagenanakan menurunkan muatan sepanjang rantai polimer. Penurunan muatan ini menyebabkan penurunan gaya tolakan (repulsion) antar gugus-gugus sulfat,

sehingga sifat hidrofilik polimer semakin lemah dan menyebabkan viskositas larutan menurun. Viskositas larutan karagenanakan menurun seiring dengan peningkatan suhu sehingga terjadi depolimerisasi yang kemudian dilanjutkan dengan degradasi karagenan (Towle 1973).

2.4.2.3PembentukanGelasi

Pembentukan gel adalah suatu fenomena penggabungan atau pengikatansilang rantai-rantai polimer sehingga terbentuk suatu jala tiga dimensibersambungan. Selanjutnya jala ini menangkap atau mengimobilisasikan air didalamnya dan membentuk struktur yang kuat dan kaku. Gel mempunyai sifatseperti padatan, khususnya sifat elastis dan kekakuan.

Struktur kappa dan iota karagenan memungkinkan bagian dari dua molekul masing-masing membentuk double helix yang mengikat rantai molekul menjadi bentuk jaringan 3 dimensi atau gel.Lamda karagenan tidak mampu membentuk double helix tersebut. Sifat ini dapat terlihat bila larutan dipanaskan kemudian diikuti dengan pendinginan sampai di bawah suhu tertentu, kappa dan iota karagenan akan membentuk gel dalam air yang bersifat reversible yaitu akan mencair kembali pada saat larutan dipanaskan (Winarno, 1990).Mekanismepembentukan gel karagenan dapat dilihat pada Gambar 2.4.

Gambar 2.4. Mekanisme pembentukan gel karagenan (Glicksman 1983).

Proses pemanasan dengan suhu yang lebih tinggi dari suhu pembentukan gelakan mengakibatkan polimer karagenan dalam larutan menjadi random coil (acak).Bila suhu diturunkan, maka polimer akan membentuk struktur double helix(pilinan ganda) dan apabila penurunan suhu terus dilanjutkan, polimer- polimer iniakan terikat silang secara kuat dan dengan makin bertambahnya bentuk heliksakan terbentuk agregat yang bertanggung jawab terhadap terbentuknya gel yangkuat (Glicksman 1969). Jika diteruskan, ada kemungkinan proses pembentukanagregat terus terjadi dan gel akan mengerut sambil melepaskan air. Proses terakhirini disebut sineresis (Fardiaz 1989).

Kemampuan pembentukan gel pada kappa dan iotakaragenan terjadi padasaat larutan panas dibiarkan menjadi dingin karena mengandung gugus3,6- anhidrogalaktosa. Adanya perbedaan jumlah, tipe, dan posisi gugus sulfatakan mempengaruhi proses pembentukan gel. Kappakaragenan sensitif terhadapion kalium dan membentuk gel kuat dengan adanya garam kalium, sedangkan

iotakaragenan akan membentuk gel yang kuat dan stabil bila ada ion Ca²⁺, akan tetapilamdakaragenan tidak dapat membentuk gel (Glicksman 1983).

Potensimembentuk gel dan viskositas larutan karagenan akan menurun denganmenurunnya pH, karena ion H⁺membantu proses hidrolisis ikatan glikosidik padamolekul karagenan (Angka dan Suhartono 2000). Konsistensi gel dipengaruhibeberapa faktor antara lain jenis dan tipe karagenan, konsistensi, adanya ion-ionserta pelarut yang menghambat pembentukan hidrokoloid (Towle 1973).

2.4.3 Kegunaan Karagenan

Karagenan sangat penting perananya sebagai stabilisator (pengatur keseimbangan), thickener (bahan pengental), pembentuk gel, pengemulsi, dan lain-lain.Sifat ini banyak dimanfaatkan dalam industri makanan, obat-obatan, kosmetik, tekstil, cat, pasta gigi dan lain-lain.

Pemanfaatan karagenan dalam bidang industri antara lain:

1. Pada industri makanan

Pada industri makanan, karagenan digunakan pada pembuatan (Indriani dan Sumiarsih, 1991):

- Es krim yaitu sebagai stabilisator, mencegah kristalisasi dari es krim.

- Susu coklat yaitu mencegah pengendapan coklat dan pemisahan krim serta meningkatkan kekentalan lemak dan pengendapan kalsium.

- Kue dan roti yaitu meningkatkan mutu adonan.

- Daging kalengan yaitu sebagai gel pengikat air atau gel pelapis produk daging.

- Makanan bayi yaitu sebagai stabilisator lemak dan protein.

- Gel susu (pudding, custard) yaitu sebagai pembentuk gel.

- Sirup yaitu sebagai pensuspensi.

2. Pada industri farmasi dan kosmetika

Pada industri farmasi dan kosmetika, karagenan digunakan pada pembuatan (Anggadiredja, dkk., 2010):

- Pasta gigi yaitu untuk memperhalus tekstur dan memperbaiki sifat busanya.

- Lotion sebagaibodying agent.

- Tablet yaitu sebagai bahan pengikat.

- Krem yaitu sebagai bodying agent.

3. Pada industri kertas dan tekstil

Pada industri kertas dan tekstil karagenan mempunyai banyak peranan (Sadhori, 1998), yaitu: pada industri kertas yaitu untuk memperhalus permukaan kertas dan pada industri tekstil yaitu sebagai painting silk pada waktu pencetakan dapat memperbaiki warna yang timbul.

4. Pada industri kulit (leather)

Pada industri kulit (leather) karagenan digunakan untuk memperhalus dan mengkilatkan permukaan kulit serta menjadikan kulit tidak kaku.

5. Pada industri cat

Pada industri cat karagenan digunakan sebagai zat warna, yaitu: zat warna yaitu sebagai pensuspensi dan water base paint yaitu sebagai bahan pengental.

6. Pada industri pertanian

Pada industri pertanian karagenan digunakan dalam pembuatan pestisida dan herbisida yaitu sebagai pensuspensi.

2.4.4 Tumbuhan Penghasil Karagenan

Sumber karagenan untuk daerah tropis adalah dari spesies Kappaphycus alvarezii (Doty) yang menghasilkan karagenan dalam bentuk kappa, Eucheuma spinosum yang menghasilkan karagenan dalam bentuk iota.Kedua jenis rumput laut tersebut banyak terdapat disepanjang pantai Filipina dan Indonesia.Sebagian besar karagenan diproduksi dari jenis Chondrus crispus yang berwarna merah tua, bentuknya seperti daun parsley, dan hidup pada kedalaman sekitar 3 meter.Jenis ini banyak tumbuh di daerah utama lautan atlantik, yaitu di pantai Kanada, Inggris dan Prancis (Winarno, 1990).

2.5Ekstraksi

Ekstraksi adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengektraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hamper semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang ditetapkan (Depkes, 1995).

Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan ataupun hewan dengan menggunakan penyari tertentu. Ada beberapa metode ekstraksi, yaitu:

A. Cara Dingin 1. Maserasi

Maserasi adalah cara ekstraksi yang paling sederhana. Bahan simplisia yang dihaluskan sesuai dengan syarat farmakope (umumnya terpotong- terpotong atau berupa serbuk kasar) disatukan dengan bahan pengekstraksi.

Selanjutnya rendaman tersebut disimpan terlindung cahaya langsung (mencegah reaksi yang dikatalis cahaya atau perubahan warna) dan dikocok berulang-ulang (kira-kira 3 kali sehari). Waktu lamanya maserasi berbeda- beda, masing-masing farmakope mencantumkan 4-10 hari. Secara teoritis pada suatu maserasi tidak memungkinkan terjadinya ekstraksi absolut.

Semakin besar perbandingan simplisia terhadap cairan pengekstraksi, akan semakin banyak hasil yang diperoleh (Voight, 1995).

2. Perkolasi

Perkolasi dilakukan dalam wadah berbenruk silindris atau kerucut (perkulator) yang memiliki jalan masuk dan keluar yang sesuai. Bahan pengekstaksi yang dialirkan secara kontinyu dari atas, akan mengalir turun secara lambat melintasi simplisia yang umumnya berupa serbuk kasar.

Melalui penyegaran bahan pelarut secara kontinyu, akan terjadi proses maserasi bertahap banyak. Jika pada maserasi sederhana tidak terjadi ekstraksi sempurna dari simplisia oleh karena akan terjadi keseimbangan kosentrasi antara larutan dalam seldengan cairan disekelilingnya, maka pada perkolasi melalui simplisia bahan pelarut segar perbedaan kosentrasi tadi selalu dipertahnkan. Dengan demikian ekstraksi total secara teoritis dimungkinkan (praktis jumlah bahan yang dapat diekstraksi mencapai 95%) (Voight,1995).

B. Cara Panas

1. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperature titik didihnya selama waktu tertentu dan dalam jumlah pelarut terbatas yang relative konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes, 2000).

2. Sokletasi

Sokletasi dilakukan dengan cara bahan yang akan diekstraksi diletakkan dalam kantung ekstraksi (kertas, karton, dan sebagainya) dibagian dalam alat ekstraksi dari gelas yang bekerja kontinyu (perkulator). Wadah gelas yang mengandung kantung ndiletakkan diantar labu penyulingan dengan pendingin aliran balik dan dihubungkan dengan labu melalui pipa. Labu tersebut berisi bahan pelarut yang menguap dan mencapai kedalam pendingin aliran balik melalui pipet yang berkodensasi didalamnya.

Menetes ketas bahan yang diekstraksi dan menarik keluar bahan yang diekstraksi. Larutan berkumpul didalam wadah gelas dan setelah mencapai tinggi maksimalnya, secara otomatis dipindahkan kedalam labu. Dengan demikian zat yang terekstraksi terakumulasi melaui penguapan bahan pelarut murni berikutnya (Voight, 1995).

2.10 Spektrofotometri Inframerah 2.10.1 Spektrum inframerah

Spektrum inframerah suatu molekul adalah hasil transisi antara tingkat energi getaran (vibrasi) yang berlainan. Inti-inti atom yang terikat oleh ikatan kovalen mengalami getaran (vibrasi) atau osilasi (oscillation). Bila molekul menyerap radiasi inframerah, energi yang diserap menyebabkan kenaikan dalam

amplitudo getaran atom-atom yang terikat itu. Jadi molekul ini berada dalam keadaan vibrasi tereksitasi (excited vibrational state); energi yang diserap ini akan dibuang dalam bentuk panas bila molekul itu kembali ke keadaan dasar(Supratman, 2010).

Bilangan gelombangdari absorbsi oleh suatu tipe ikatan, bergantung pada macam getaran dari ikatan tersebut. Oleh karena itu, tipe ikatan yang berlainan (C-H, C-C, C=O, C=C, O-H, dan sebagainya) menyerap radiasi inframerah pada panjang gelombang yang berlainan. Dengan demikian spektrofotometri inframerah dapat digunakan untuk mengidentifikasi adanya gugus fungsi dalam suatu molekul. Banyaknya energi yang diserap juga beraneka ragam dari ikatan ke ikatan. Ini disebabkan sebagian oleh perubahan dalam momen dipol (µ≠0) pada saat energi diserap. Ikatan nonpolar (seperti C - H atau C-C) menyebabkan absorpsi lemah, sedangkan ikatan polar (seperti misalnya O-H, N-H, dan C=O) menunjukkan absorpsi yang lebih kuat(Supratman, 2010).

Bila suatu senyawa menyerap radiasi pada suatu panjang gelombang tertentu, intensitas radiasi yang diteruskan oleh contoh berkurang. Ini mengakibatkan suatu penurunan dalam %T dan terlihat pada spektrum sebagai suatu sumur (dip) yang disebut puncak absorpsi atau pita absorpsi. Bagian spektrum di mana %T menunjukkan angka 100 (atau hampir 100) disebut garis dasar (base line), yang direkam pada spektrum inframerah pada bagian atas (Supratman, 2010).

2.10.2 Spektroskopi inframerah fourier transform

Radiasi inframerah dapat dianalisis dengan spektroskopi FTIR (Fourier Transform Infrared)yang bagiannya terdiri dari cermin gerak, cermin statik, dan pembagi berkas radiasi. Radiasi yang berasal dari sumber radiasi inframerah dikolimasikan oleh sebuah cermin cekung ke pembagi berkas radiasi, setengah berkas dilewatkan cermin statik dan setengah berkas lainnya ke cermin gerak.

Pergerakan cermin memodulasi semua panjang gelombang (frekuensi) dalam berkas radiasi. Setelah terjadi refleksi pada kedua cermin, kedua berkas tersebut bergabung kembali pada pembagi berkas radiasi(Satiadarma, dkk., 2004).

Meskipun cahaya masuk inkoheren, pemecahan menjadi dua berkas dan penggabungannya kembali pada pembagi menjamin bahwa keduanya dapat bergabung sepertinya koheren. Sebagai hasilnya, kedua berkas panjang gelombangnya dapat berinterferensi dengan kadar yang berbeda. Berkas gabungan lewat melalui sel sampel dan sampai ke detektor. Dengan pengkuran tanpa dispersi panjang gelombang, semua panjang gelombang jatuh secara bersamaan pada detektor yang memberikan keuntungan dibandingkan dengan metode dispersi (Satiadarma, dkk., 2004).

Kelebihan-kelebihan dari spektroskopi FT-IR (Fourier Transform Infrared)mencakup persyaratan ukuran sampel yang kecil, perkembanagan spektrum yang cepat, dan karena instrumen ini memiliki komputer yang terdedikasi, kemampuan untuk menyimpan dan memanipulasi spektrum (Stevens, 2001). Spektroskopi FTIR (Fourier Transform Infrared) pada prinsipnya sama dengan prinsip dari spektroskopi inframerah, hanya saja spektroskopi FTIR (Fourier Transform Infrared)ditambahkan suatu alat optik (Fourier Transform) untuk menghasilkan spektra yang lebih baik, sehingga

spektroskopi FTIR (Fourier Transform Infrared)dapat menghasilkan data-data dimana dengan spektroskopi inframerah puncak yang diinginkan tidak muncul (Khan, 2002).

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian merupakan metode eksperimental yang meliputi penyiapan bahan tumbuhan, pemeriksaan karakteristik simplisia, isolasi karagenan terhadap variasi suhu dan waktu, pemeriksaan karakteristik karagenan meliputi identifikasi kualitatif, penetapan viskositas, susut pengeringan, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu tidak larut asam, Spektrofotometri FTIR(Fourier Transform Infrared)dan analisis data.

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Departemen Biologi Universitas Sumatera Utara Medan dan Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan.

3.1 Alat

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi alat-alat gelas laboratorium, cawan porselin, desikator, lemari pengering, hot plate (Fissons), mikroskop (Olympus),blender (National), termometer, indikator universal, penangas air (Yenaco), spatula, labu bersumbat, botol timbang dangkal bertutup, neraca kasar, neraca listrik (Vibra), seperangkat alat destilasi penetapan kadar air, Spektrofotometri FTIR (Shimadzu), kaca objek, kaca penutup, krus tang, kain blacu, mortir dan stamper dan alumunium foil.

3.2 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan padapercobaan adalah talus rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty), asam klorida,kloroform, isopropanol,kalsium klorida,natrium hidroksida,hidrogen peroksida, kloralhidrat yang berkualitas pro analisis (E. Merck) dan air suling.

3.3PembuatanLarutanPereaksi

3.3.1 Larutan natrium hidroksida 0,1N (b/v)

Sebanyak 4 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dalam air suling hingga diperoleh 1000 ml larutan (Depkes,1978).

3.3.2 Larutan asam klorida 2 N (v/v)

Larutan 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1979).

3.3.3Larutan hidrogen peroksida 1 % (v/v)

Sebanyak 2 ml hidrogen peroksida 50% diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1979).

3.3.4Larutan kalsium klorida 1% (b/v)

Sebanyak 1 g kalsium klorida dilarutkan dalam air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes,1978).

3.4Penyiapan Bahan Tumbuhan

Penyiapan bahan tumbuhan meliputi pengambilan bahan tumbuhan, identifikasi tumbuhan, dan pengolahan bahan tumbuhan.

3.4.1 Pengumpulanbahan tumbuhan

Bahan tumbuhanpada penelitian ini adalah bahan tumbuhan yang telah dikumpulkan oleh Milala (Mahasiswi Universitas Tjut Nyak Dien.Medan pada tahun 2012).Bahan tumbuhan yang digunakan adalah rumput laut Kappaphycus alvarezii (Doty) yang berasal dari desa Kutuh Banjar Kaja Jati,Kecamatan Kuta Selatan, Kabupaten Badung Bali, Provinsi Bali

3.4.2Identifikasitumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan di Pusat Penelitian Oseanografi - LIPI di Jakarta.Hasil identifikasi bahan tumbuhan adalah Kappaphycus alvarezii (Doty)yang sebelumnya diidentifikasi oleh Milala(Mahasiswi Universitas Tjut Nyak Dien.Medan pada tahun 2012).Hasil identifikasi tumbuhan dapat dilihat pada Lampiran 1,halaman 46.

3.4.3 Pembuatan simplisia rumput laut

Bahan tumbuhan dibersihkan dari kotoran-kotoran yang melekat seperti pasir dan garamdengan cara di cuci dengan air mengalir sampai bersih, ditiriskan dan ditimbang beratnya.Kemudian dikeringkan dengan cara dianginkan terlebih dahulu, lalu dikeringkan dilemari pengering hingga kering,dan ditimbang beratnya. Gambar serbuk simplisia dapat dilihat pada Lampiran3, halaman 48.

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia 3.5.1 Pemeriksaan makroskopik simplisia

Pemeriksaan makroskopik dilakukan terhadap simplisia.Pengamatan makroskopik meliputi pengamatan terhadap bentuk talus, bentuk percabangan danwarna talusnya.Gambar makroskopik simplisia dapat dilihat pada Lampiran2, halaman 47.

3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia. Serbuk simplisia ditaburkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup, kemudian diamati di bawah mikroskop. Gambar mikroskopik dapat dilihat pada Lampiran 4,halaman 58.

3.5.3 Penetapan kadarair

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi(destilasi toluen). Alat terdiri dari alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung dan tabung penerima.

1. Penjenuhan toluen

Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat,di atas alat penampung dan pendingin,kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

2. Penetapan kadar air simplisia

Sebanyak 5g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam labu yang berisi toluen yang telah dijenuhkankemudian dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilasdengan toluen.Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar, setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dengan persen (WHO,1992).Hasil perhitungan penetapan kadar air dapat dilihat pada Lampiran5,halaman 59.

3.5.4 Penetapan kadarsari yang larut dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara.Sisa dipanaskan pada suhu 105^oC sampai bobot tetap. Kadar dalam

persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1978). Hasil perhitungan penetapan kadarsari yang larut dalam air dapat dilihat pada Lampiran 5, halaman 60.

3.5.5 Penetapan kadarsari yang larut dalam etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama,kemudian dibiarkan selama 18 jam. Selanjutnya disaring cepat untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105⁰C sampai bobot tetap.Kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan(Depkes, 1978). Hasil perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol dapat dilihat pada Lampiran 5, halaman 61.

3.5.6 Penetapan kadarabu total

Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran dilakukan pada suhu 600^oC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1978).Hasil perhitungan penetapan kadar abu total dapat dilihat pada Lampiran5, halaman 62.

3.5.7 Penetapan kadarabu yang tidak larut dalam asam

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam

dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1978). Hasil perhitungan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam dapat dilihat pada Lampiran5,halaman 63.

3.6 Isolasi Karagenan

Isolasi karagenan dilakukan dengan 4 tahap yaitu: tahap pra ekstraksi, tahap ekstraksi, tahap pengendapan, tahap pengeringan dan tahap penggilingan.

a. Tahap pra ekstraksi

Tahap pra ekstraksi terdiri dari 2 tahap yaitu:tahap perendaman dan tahap pemucatan.

Tahap perendaman

Cara :Sebanyak 20g serbuk simplisia direndam dalam kalsium klorida 1%

selama 2 jam, kemudian di saring dan residu dicuci dengan air suling.

Tahap pemucatan

Cara :Residu yang telah dicuci kemudian di pucatkan dengan larutan hidrogen peroksida konsentrasi 1% selama 6 jam, lalu disaring dan dicuci dengan air suling.

b. Tahap ekstraksi

Residu yang telah dipucatkan diekstraksi dengan perlakuan sebagai berikut:

1. Perlakuan waktu ekstraksi (T) terdiri dari 3 taraf yaitu:

T₁₌ 30 menit; T₂= 60 menit; T₃ = 120 menit 2. Perlakuan suhu (C) terdiri dari 3 taraf yaitu:

C1 = 80^oC; C2 = 90^oC; C3 =100^oC

Cara :Residu yang telah dipucatkan diekstraksi dengan air suling sebanyak 200 ml dalam beaker glass, kemudian ditambahkan natrium hidroksida 0,1 N sampai dengan diperoleh pH 9, kemudian dipanaskan menggunakan hot platepadasuhu80^oC selama 30 menit. Dilanjutkan dengan perlakuan waktu ekstraksi 60 menit, dan 120 menit padasuhu yang sama. Percobaan diulangi sebanyak 2 kali pada suhu dan waktu ekstraksiyang sama. Demikian juga ekstraksi dilakukan padasuhu90^oC dan 100^oC dengan perlakuan waktu ekstraksi yang sama seperti di atas. Hasil dapat dilihat pada Lampiran6, halaman 64dan Lampiran8,halaman 70 dan 71.

c. Tahap pengendapan

Setelah ekstraksi selesai, disaring menggunakan kain blacu.

Filtratnyaditampung dalam beaker glass kemudian ditambahkan isopropil alkohol dengan perbandingan 1:2, lalu didiamkan selama 24 jam untuk mengendapkan karagenan.

d. Tahap pengeringan dan penggilingan

Karagenan yang diperoleh laludisaring dan dikumpulkan,kemudian dikeringkan di dalam oven pada suhu 50^oC, lalu dibuat serbuk.Gambar karagenan hasil isolasi dapat dilihat pada Lampiran9, halaman 72.

3.7Pemeriksaan KarakteristikKaragenan

Pemeriksaan karakteristik karagenan meliputipenetapan viskositas, penetapansusut pengeringan,penetapan kadar abu total,dan penetapan kadarabu yang tidak larut dalam asam.Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada Lampiran8, halaman 71.

3.7.1 Penetapan viskositas

Alat: Viskometer Thomas Stromer.

Cara: Karagenan dilarutkan dengan konsentrasi 1,5% yang diukur pada suhu 75^oC,Viskometer Thomas Stromerdiletakkan ditepi meja yang datar sehingga alat penggerak dengan beban 25 g dapat jatuh tanpa gangguan. Kemudian beaker glassyang berisi 100 ml larutan karagenan hasil isolasi diletakkan diatas meja pengukuran, dinaikkan sampai rotor baling-baling terendam ditengah- tengah bahan tumbuhan dan mencapai tanda pada tangkai rotor. Selanjutnya rem dilepaskan dan diukurwaktu yang diperlukan untuk mencapai 100 kali putaran dengan menggunakan stopwatch. Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada Lampiran6,halaman 68, Lampiran8,halaman 70 dan Gambar alat viskometer Thomas Stromer dapat dilihat pada Lampiran 10, halaman 73.

3.7.2 Penetapan susut pengeringan

Susut pengeringan adalah kadar bagian yang menguap dari suatu zat.

Sebanyak 1 g serbuk keringdimasukkan ke dalamcawan dangkal bertutup yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105^oC selama 30 menit. Zat diratakan dalam cawan hingga merupakan lapisan setebal 5-10 mm, dimasukkan ke dalam ruang pengering,dibuka tutupnya,dikeringkan pada suhu penetapan hingga bobot tetap. Susut pengeringan dihitung terhadap bahan awal (Depkes, 1978).

Hasil perhitungan penetapan susut pengeringan dapat dilihat pada Lampiran 6, halaman 65.

3.7.3 Penetapan kadarabu total

Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran dilakukan pada suhu 600^oC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1978).Hasil perhitungan penetapan kadar abu total karagenan dapat dilihat pada Lampiran6, halaman 66.

3.7.4 Penetapan kadarabu yang tidak larut dalam asam

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan(Depkes, 1978). Hasil penetapan kadar abu tidak larut asam dapat dilihat pada Lampiran6,halaman 67.

3.8Pemeriksaankaragenan hasil isolasi dengan Spektrofotometri FTIR Serbukkaragenan dicampur dengan KBr kemudian ditekan hingga diperoleh pelet, kemudian dimasukkan ke dalam alat Spektrofotometri FTIR,diukur serapannya pada frekuensi 4000-400 cm^-1.Spektrum FTIR

karagenan hasil isolasi dapat dilihat pada Lampiran7,halaman 69.Gambar alat Spektrofotometer FTIRdapat dilihat pada Lampiran 10, halaman 73.

3.9Identifikasi Jenis Karagenan Hasil Isolasi

Jenis karagenan hasil isolasi dapat diidentifikasi dengan melihat daya kelarutan karagenanpada berbagai media pelarut seperti diukur pada Tabel 3di bawah ini (Indriani dan Sumarsih,1991). Hasil dapat dilihat pada Lampiran 8, halaman 67.

Tabel 3 Identifikasi karagenan menurut kelarutannya

No Medium Kappa Iota Lamda

1 Air Panas Larut di atas

60^oC Larut di atas 60^oC Larut 2 Air dingin Garam natrium

larut, garam K, Ca, tidak larut

Garam Na larut Ca memberi dispersi thixotropic

Larut

3 Susu panas Larut Larut Larut

4 Susu dingin Garam Na, Ca, K tidak larut tetapi akan mengembang

Tidak larut Larut

5 Larutan gula pekat

Larut

(Dipanaskan)

Larut, sukar Larut (Dipanaskan)

Larut

(dipanaskan) 6 Larutan garam

pekat

Tidak larut Larut

(dipanaskan)

Larut

(dipanaskan)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasiyang dilakukan oleh Pusat Penelitian Oseanografi – LIPI terhadap rumput laut yang diteliti adalah jenis Kappaphycus alvarezii (Doty),divisi Rhodophyta, kelas Rhodophyceae, bangsa Gigartinales, suku Solieriaceae, marga Kappaphycus.

Hasil pemeriksaan makroskopik dari talus Kappaphycus alvarezii (Doty) diperoleh talus bentuk gepeng, licin, lunak fleksibel (gelatinous),warna merah kecoklatan.Percabanganberselang-seling tidak teratur pada kedua sisi talus pada bagian bawah melebar dan mengecil ke bagian puncak, pinggir talus bergerigi dan ujung talusnya tajam seperti duri. Hasilidentifikasi talus Kappaphycus alvarezii (Doty) samadengan yang di teliti oleh Munthe (2012).Hasil ini juga

sama dengan yang diteliti oleh Milala (2012), karena ada persamaan tersebut bahan tumbuhan masih bisa digunakan oleh peneliti.

4.2 Hasil Karakterisisasi Simplisia

Hasil pemeriksaan mikroskopis serbuk simplisia Kappaphycus alvarezii (Doty)terlihat adanyafragmen sel-sel parenkim berbentuk poligonal tidak beraturan, yang berisi pigmen berwarna merah dan terdapat sel–sel propagule ini merupakansel yang berperan untuk perkembangbiakan atau propagation.Hasil karakteristik simplisia talus Kappaphycus alvarezii (Doty)dibandingkandengan yang diteliti Munthe 2012 dapat dilihatpada Tabel 4.1 (Polifrone,et al., 2006).

Tabel 4.1. Hasil karakteristik simplisia talus Kappaphycus alvarezii(Doty)

No Parameter

Hasil (%)

Bali Sumatera Utara *

1 Kadar air 8,64 9,29

2 Kadar sari yang larut dalam air 22,5 25,73

3 Kadar sari yang larut dalam etanol 1,10 1,22

4 Kadar abu total 3,20 3,03

5 Kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,13 0,11

Keterangan : * Hasil yang diteliti oleh Munthe (2012)

Hasil karakteristik simplisia yang di teliti menunjukkan bahwa kadar air telah memenuhi persyaratan karena tidak lebih dari 10%, sedangkan kadar sari yang larut dalam air, kadar sari yang larut dalam etanol, kadar abu total, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam tidak tidak jauh berbeda dengan Munthe (2012).

Persyaratan untuk karakteristik simplisia diatas tidak tercantum dalam Materia Medica Indonesia (MMI) dan Farmakope Herbal Indonesia (FHI),

sehingga dapat digunakan sebagai acuan parameter untuk karakterisktik simplisia.

4.3 Hasil Isolasi Karagenan

Isolasi karagenan talus Kappaphycus alvarezii (Doty) mendapatkan hasil yang baik dan berwarna putih dapat untuk dilakukan dengan penambahan kalsium klorida (Sinaga, 2002).Tujuan penambahan hidrogen peroksida dimaksudkan untuk memperoleh serbuk karagenan yang putih. Ekstraksi karagenan dilakukan pada pH 9, karena stabil pada pH tersebut, danpada suasana asam karagenan akan terdegradasi(USP XXX, 2007). Hasil perhitungan rendemen karagenan hasil isolasi dapat dilihat pada Tabel 4.2 di bawah ini dibandingkan dengan yang dilakukan oleh Munthe (2012).

Tabel 4.2. Hasil perhitungan rendemen karagenan hasil isolasidari talus Kappaphycus alvarezii(Doty)

Perlakuan

Berat Sampel (G) Karagenan hasil isolasi

% Rendemen Rata-Rata%

Karagenan hasil isolasi

Karagenan hasil isolasi

1 2 1 2 1 2 Bali Sumatera

Utara*

T₁C₁ 20,155 20,154 6,068 5,906 30,107 29,304 29,71 24,80 T1C2 20,154 20,155 6,284 6,102 31,180 30,275 30,73 25,81 T1C3 20,153 20,155 6,332 6,243 31,420 30,975 31,20 26,24 T₂C₁ 20,154 20,155 5,508 7,610 27,330 37,757 32,54 37,21 T₂C₂ 20,152 20,153 9,304 9,220 46,169 45,750 45,96 37,58 T2C3 20,155 20,155 8,101 8,460 40,194 41,975 41,08 36,22 T3C1 20,152 20,153 7,642 7,787 37,922 38,639 38,28 33,32 T₃C₂ 20,153 20,155 7,223 7,032 35,841 34,890 35,36 33,95 T3C3 20,155 20,155 6,176 6,101 30,643 30,270 30,45 33,10

Keterangan:

T = Waktu ekstraksi, T1=30 menit, T2 =60 menit, T3 =120 menit, C = Suhu, C₁=80^oC, C₂=90^oC, C₃= 100^oC

* Hasil yang diteliti oleh Munthe (2012)

Hasil perhitungan rendemen karagenan di atasmenunjukkan bahwa pada waktu ekstraksi 30 menit dengan suhu 80 – 100^oC dan pada waktu ekstraksi 60